病理科组织活检标本处理技巧教程.pptxVIP

病理科组织活检标本处理技巧教程演讲人：日期:

目录CONTENTS标本固定技巧1脱水与透明处理2包埋与切片制作3染色技术与方法4质量控制与安全5

单击添加学生社团活动总结章节页标题Part.01

完整性检查核对送检标本的容器密封性、标签清晰度及与申请单信息的一致性，确保无渗漏或交叉污染风险。时效性确认记录标本送达时间，评估是否符合预设的保存时限要求（如冷冻标本需在2小时内处理）。异常处理对破损、标识模糊或信息不符的标本，立即联系临床科室并填写《异常标本记录表》，明确后续处理方案。标本接收标准流程

双重核对系统采用电子扫描与人工复核结合的方式录入患者ID、标本类型及取材部位，确保数据零误差。条码化标签生成唯一性条码标签并粘贴于标本瓶及申请单，支持全流程追溯管理。电子备份将登记信息实时同步至实验室信息管理系统（LIS），并自动触发后续处理流程提醒。信息登记与标签管理

初步评估与分类根据组织形态（如穿刺、切除或腔镜标本）及临床需求（常规病理/冰冻切片/分子检测）进行分类。标本类型识别评估是否需要特殊固定（如淋巴瘤标本需优先处理）或即刻取材（如钙化组织需脱钙预处理）。预处理需求判定对肿瘤根治术等紧急标本加注“加急”标识，优化实验室资源分配。优先级标记

标本固定技巧Part.02

作为常规固定液的首选，其渗透性强且能保持组织形态稳定性，适用于大多数病理标本的固定，尤其对细胞核和细胞质的保存效果显著。固定液选择与应用中性缓冲福尔马林（NBF）适用于特殊染色或分子检测的标本，如免疫组化或PCR，但需注意其可能导致组织收缩，需与其他固定液混合使用以优化效果。乙醇类固定液针对特定组织类型（如睾丸、骨髓）设计，能增强染色对比度，但需严格遵循配制比例以避免组织过度硬化或染色异常。专用固定液（如Bouin液、Zenker液）

固定时间控制常规组织固定时间体积较小的活检标本需固定6-12小时，确保固定液充分渗透至组织中心，避免因时间不足导致中心区域自溶或固定不均。大体积标本处理如淋巴结或富含酶的器官（胰腺），需缩短固定时间至4-6小时并优先处理，防止组织过固定影响后续诊断准确性。需延长固定时间至24-48小时，必要时进行剖开处理以促进固定液渗透，同时需定期更换固定液以维持其有效性。时间敏感性标本

常见问题避免固定液体积应为标本体积的10-15倍，过量可能导致组织脆化，不足则引发固定不全，需严格量化操作。固定液不足或过量延迟固定固定液pH值异常标本离体后需立即固定，延迟超过30分钟可能引起组织自溶或抗原降解，尤其对热敏感标本（如乳腺、甲状腺）影响显著。定期检测固定液pH值（维持7.2-7.4），酸性环境易导致组织收缩或染色偏暗，需使用缓冲液调节并避免长期存放失效。

脱水与透明处理Part.03

梯度乙醇脱水法异丙醇渗透性优于乙醇，可缩短脱水时间，尤其适用于致密组织（如骨、软骨）。但需注意其挥发性强，需在密闭系统中操作以减少试剂损耗。异丙醇替代方案环保型脱水试剂如聚乙二醇（PEG）基脱水剂，可减少毒性试剂使用，但需验证其对组织形态学和后续染色（如HE、免疫组化）的影响。采用从低浓度（70%）到高浓度（100%）的乙醇梯度脱水，逐步置换组织中的水分，避免组织收缩或变形。高浓度乙醇需严格控制时间，防止组织过度硬化。脱水试剂选择

脱水周期优化组织类型差异化处理脂肪组织需延长脱水时间（如100%乙醇中2小时），而疏松组织（如肺）可缩短至1小时。需结合组织厚度调整周期，一般每3-5mm厚度增加30分钟脱水时间。推荐使用程序化脱水仪，设定阶梯式时间（如70%乙醇1小时→95%乙醇1.5小时→100%乙醇2小时），并定期校准试剂浓度以避免脱水不足或过度。脱水过程建议在室温（20-25℃）下进行，高温可能加速试剂挥发并导致组织脆化，低温则延长脱水周期。自动化脱水机参数设置温度控制

透明处理注意事项考虑使用柠檬烯或松油烯等生物兼容性透明剂，降低对操作人员的呼吸道刺激，但需评估其对石蜡浸透的影响。二甲苯的安全替代品常规组织透明时间为1-2小时，过度透明会导致组织变脆（如淋巴结），而透明不足则影响石蜡渗透。建议每30分钟检查组织透明度变化。透明时间控制使用前需检测透明剂含水量（如二甲苯含水率应0.1%），含水过高会导致透明效率下降，必要时添加分子筛脱水。废弃透明剂需分类回收，避免环境污染。透明剂纯度管理

包埋与切片制作Part.04

包埋材料准备石蜡选择与处理选用高纯度、低熔点的石蜡作为包埋介质，需预先脱气处理以避免气泡影响组织完整性，同时根据组织类型调整石蜡硬度。组织定位与方向调整在包埋前需精确规划组织切面方向，确保切片时能完整展示目标结构（如肿瘤边缘或特定解剖层次）。包埋模具清洁与校准使用无尘、无残留的金属或塑料模具，定期检查模具平整度，确保包埋后组织块边缘整齐