SGLT-2抑制剂恩格列净对小鼠缺血性脑损伤的作用及其机制研究.pdfVIP

摘要

目的：脑卒中是临床上一种常见的脑血管疾病，包括出血性脑卒中和缺血性

脑卒中。缺血性脑卒中病例约占65%-80%，已在全球范围内成为病人致死和致

残的主要原因之一。然而，由于缺血性脑卒中病理机制十分复杂，目前临床治疗

药物非常有限，且给药时间窗狭窄、不良反应较多，部分药物虽然可减轻神经损

伤，但无法显著改善卒中后的神经功能损伤及患者生存质量，因此亟需寻找更有

效的针对脑卒中的治疗药物。高糖血症是缺血性脑卒中的常见并发症，卒中后血

糖升高的程度与脑卒中患者的预后情况和死亡率密切相关，多项研究表明，控制

卒中的血糖可以改善脑卒中预后。目前临床主要使用胰岛素注射以控制缺血性脑

卒中后的高糖血症。然而，胰岛素剂量较难控制，引起的低糖血症反而加重缺血

性脑损伤。因此需要寻找一种可以替代胰岛素的安全降糖药物控制卒中后血糖。

钠-葡萄糖协同转运蛋白2（sodium-dependentglucosetransports2，SGLT-2）

是位于肾小管上皮细胞中的葡萄糖转运体，是参与肾脏葡萄糖重吸收的主要蛋白。

SGLT-2抑制剂是一类新型抗糖尿病药物，通过抑制肾脏对葡萄糖的重吸收，促

进葡萄糖从尿液中排除，从而快速的降低血糖。恩格列净是一种SGLT-2抑制剂，

已有研究发现，恩格列净除了降低血糖之外，还可以通过降低动脉硬化程度实现

降压效果，改变能量供应等途径改善心脏和肾脏功能，提示其可能作为一种潜在

的抗脑缺血损伤药物。因此，本研究旨在明确恩格列净对缺血性脑损伤及其神经

功能损伤的潜在保护作用，并初步探索其作用机制。

方法：选择雄性C57BL/6小鼠进行光化学栓塞法建立急性脑缺血损伤模型，

并于其后14d连续观测神经功能损伤。在光栓造模后连续7d或14d每天灌胃

给予小鼠恩格列净3，10，30mg/kg，在给药后指定时间（1,3,5,7天）每隔3小

时记录小鼠血糖；每天进行圆筒实验和网格实验检测小鼠运动功能。在光栓造模

后连续7d给予小鼠恩格列净10mg/kg恩格列净并同时注射给予10%葡萄糖；

通过网格实验和圆筒实验检测葡萄糖能否逆转恩格列净对小鼠运功功能的改善

作用。

利用雄性C57BL/6小鼠进行永久性大脑中动脉阻塞（permanentmiddle

cerebralarteryocclusion，pMCAO）或短暂性大脑中动脉阻塞（transientMCAO）

分别建立急性脑缺血获脑缺血/复灌模型。在pMCAO手术完成后一小时灌胃给

予小鼠恩格列净10，30mg/kg，手术后24h检测药物作用指标（脑梗死体积和

神经症状评分）；在tMCAO手术完成后1h灌胃给予小鼠恩格列净10，30mg/kg，

手术后24h检测脑梗死体积和神经症状评分，考察恩格列净对急性脑缺血损伤

的作用。

在小鼠光栓造模后7d用甲苯胺蓝染色检测小鼠梗死体积，利用免疫荧光检

测梗死灶周围区域神经细胞数量；在小鼠光栓造模后7d，通过观察梗死区域小

胶质细胞数量以及其突起检测小胶质细胞激活情况。

结果：在光栓造模手术后灌胃给予恩格列净显著降低血糖，并且能维持18-21

h；在光栓造模手术后连续14d和连续7d灌胃给予恩格列净，在10mg/kg剂量

下，小鼠错步率和趴壁不对成率均显著下降，在30mg/kg剂量下，小鼠错步率

和趴壁不对成率显著上升，在3mg/kg剂量下，小鼠错步率和趴壁不对成率无显

著变化。同时给予葡萄糖不能逆转10mg/kg恩格列净对神经功能的保护作用，

表现为小鼠错步率和趴壁不对成率无显著变化。tMCAO手术后1h灌胃给予恩

格列净不能显著降低脑梗死体积和神经损伤评分；在pMCAO手术后1h灌胃给

予恩格列净显著增加脑梗死体积和神经损伤评分。免疫荧光结果显示，光栓造模

手术后缺血区域梗死体积和神经细胞死亡情况无显著变化，而缺血区域小胶质细

胞激活被10mg/kg恩格列净所逆转。

结论：恩格列净可改善局灶性缺血引起的小鼠神经功能损伤，其药效和对应

作用呈现剂量依赖性。恩格列净的上述保护作用与可能其降血糖效应无关，或与

其抑制小胶质细胞过度激活进有关。恩格列净对大脑中动脉栓塞所致小鼠缺血性

脑损伤无保护作用。

关键