高中生物专题一基因工程详细知识点人教版选修.docVIP

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1.基因工程〔DNA重组技巧/基因拼接技巧〕

基因工程是指依照人们的欲望，进展严厉的计划，并经过体外

DNA重组跟转基因等

技巧，给予生物以新的遗传特征，从而制造出更契合人们需求的新的生物范例跟生

物产品。因为基因工程是在DNA分子程度长进展计划跟施工的，因而又叫做DNA重

组技巧或基因拼接技巧。

2.DNA重组技巧的根本东西

①、“分子手术刀〞——限度性核酸内切酶〔限度酶〕

A、感化——限度性核酸内切酶能识不双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并在

使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开

B、限度性内切酶的切割方法：①在核心轴线两侧将

DNA切开，瘦语是黏性末了。

②沿着核心轴线切开DNA，瘦语是平末了。

年夜肠杆菌的一种限度酶〔EcoRⅠ)能识不GAATTC序列，SmaI识不CCCGGG序列:

他们识不的核苷酸序列差别,然而切点基本上在G↓C之间。

C、比拟有关的DNA酶

〔1〕DNA水解酶：能够将DNA水解成四种脱氧核苷酸，完全水解成膦酸、脱氧核糖

跟含氮碱基

〔2〕DNA解旋酶：能够将DNA或DNA的某一段解成两条长链，感化的部位是碱基跟

碱基之间的氢键。留意：使DNA解成两条长链的办法除用解旋酶以外，在恰当的高

温〔如94℃〕、重金属盐的感化下，也可使DNA解旋。

〔3〕DNA聚合酶：能将单个的核苷酸经过磷酸二酯键衔接成

DNA长链。

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〔4〕DNA衔接酶：是经过磷酸二酯键衔接双链DNA的缺口。留意比拟DNA聚合酶跟

DNA衔接酶的异同点。

②.DNA衔接酶——“分子缝合针〞

〔1〕DNA衔接酶的分类：E.coliDNA〔年夜肠杆菌〕衔接酶跟T4DNA〔T4噬菌体〕连

接酶。

〔2〕感化及感化部位：E.coliDNA衔接酶感化于黏性末了被切开的磷酸二酯键，

T4DNA衔接酶感化于黏性末了战争末了被切开的磷酸二酯键〔平末了较弱〕。

③.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车〞

〔1〕分子运载车的分类：①质粒：常存在于原核细胞跟酵母菌中，是一种分子品质

较小的环状的暴露的DNA分子，独破于拟核之外。②病毒：常用的病毒有噬菌体、

动动物病毒等。

〔2〕运载体运用的目标：①是用它做运载东西，将目标基因转运到宿主细胞中去。

②是应用它在受体细胞内对目标基因进展少量复制。

〔3〕作为运载体必需具有的前提：①在宿主细胞中保管上去并少量复制

②有多

个限度性内切酶切点

③有必定的标记基因，便于挑选

3.基因工程的根本操纵顺序

目标基因的猎取→基因表白载体的构建→将目标基因导入受体细胞→目标基因的检

测与判定

一、基因的构造：

基因是有遗传效应的DNA片断(注：RNA病毒为RNA)，分为编码区跟非编码区。

非编码区

编码区

非编码区

编码区卑鄙

编码区卑鄙

编码区：能转录出mRNA，原核生物中也确实是能编码卵白质的区段

非编码区：不克不及转录出mRNA，也不克不及编码卵白质的区段

〔１〕原核细胞基因的构造

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非编码区

编码区

非编码区

启动子

停止子

RNA聚合酶联合

位点

非编码区中存在调控遗传信息表白的核苷酸序列:

①编码区卑鄙的RNA聚合酶联合位点，即启动子，可操纵RNA聚合酶的联合。RNA

聚合酶是一种卵白质，能识不并联合调控序列中的联合位点，能催化DNA转录为RNA

②编码区卑鄙有停止子，可操纵RNA聚合酶的停顿、零落。

〔2〕真核细胞基因的构造

非编码区

编码区

非编码区

启动子

编码区卑鄙

外显子

内含子

(能编码卵白质

)(不克不及编码卵白质

)

调控遗传信息的表白

(调控序列

)

二基因工程的根本操纵顺序

1、目标基因的猎取：

A目标基因要紧是指编码卵白质的构造基因，现在被普遍提取运用的目标基因有：

苏云金杆菌抗虫基因、动物抗病基因〔抗病毒、抗细菌

B取得目标基因的办法

)、人胰岛素基因等。

〔1〕从基因文库中猎取目标基因：

根本观点的了解：

①将含有某种生物差别基因的很多DNA片断，导入受体菌的群体中贮存，各个受体

菌分不含有这种生物的差其余基因，称为基因文库。

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②将某种生物体内的DNA全体提掏出来，选用恰当的限度酶，将DNA切成必定范畴

巨细的DNA片断，而后将这些片断分不与载体衔接起来，导入受体菌的群体中贮存，

每个受体菌都含有了一段差其余DNA片断。那个群体包括了这种生物的一切基因。

这种基因文库叫基因组文库。

③有些基因文库比拟小，只包括了一种生物的一部分基因，这种基因文库叫做部分

基因文库，如cDNA文库〔用某种生物发育的某个时代的mRNA反转录发生的多种互

补DNA〔也叫cDNA〕片断，与载体衔接后贮存在一个受体菌群中，那个受体菌群体

叫做这种生物cDNA文库。〕

怎么样提取：

依照目标基因有关信息，比方，依照基因的核苷酸序列，基因