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2023.18科学技术创新-21-

利用汞膜修饰电极对培养基环境下成肌细胞

吸收Cu2+的定量分析研究

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朱晓璐*袁程浩袁赵文杰袁尹曦袁卢胜波

（1.河海大学机电工程学院，江苏常州；2.康达斯（南京）科技有限公司，江苏南京）

要：本文提出针对细胞培养基的特性，通过优化的差分脉冲溶出伏安法测量成肌细胞对铜离子的吸收

2+

量。在三电极体系中采用120mg/L的Hg在-0.2V下对工作电极镀膜，实现检测铜离子最低0.5ng/mL的浓

度变化量，本方法对细胞培养基内铜离子的线性测量范围约为1-150ng/mL，且溶出峰约在-0.20V至-0.15V

之间，并具有高选择性和快速特性。试验结果表明，在初始外加10和50ng/mLCu2+的含血清培养基中，成肌

细胞3天后对其吸收分别为15.2和29.6ng/ml。本文亦讨论了在培养基条件测得的Cu2+溶出峰相对水溶液

发生左移的可能机制。

关键词：电化学三电极体系；阳极溶出伏安法；细胞培养基；铜

中图分类号R329.2文献标识码A文章编号2096-4390渊2023冤18-0021-04

铜是生物体必须的微量元素，成年人每天正常的化学三电极系统，修饰的玻碳电极为工作电极(3mm

铜摄入量约为1.5耀3mg[1]。生物体铜离子浓度需维持GCE)，AgCl/Ag电极为参电极，铂片电极为对电极。

在一个相对稳定的水平(如，血清铜10耀20滋mol/L)，试验试剂材料与细胞培养方法：浓度120mg/L

浓度过高或过低会造成严重生理问题，甚至危及生Hg2+溶液；浓度0.1g/LCu2+溶液；浓度0.1g/LPb2+溶

[2-3][4]

命。铜对细胞代谢具有重要作用，铜代谢障碍会引液；醋-醋钠缓冲液（0.1mol/L）；Dulbeccos

起Menkes氏综合征和Wilson氏综合征。modifiedeaglemedium（DMEM）培养基；完全培养基

为了实现对细胞的非破坏式的金属离子吸收度是包含10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素双抗的

的高灵敏度且满足生物学研究需求的高精度定量检DMEM溶液。实验所用C2C12细胞，于37益，5%CO2

测，本文提出针对细胞培养基的特性，优化基于汞膜条件下培养，约每48h传代一次。

修饰工作电极的电化学测量设置，在对细胞完全培养1.2玻碳电极预处理

基内铜离子浓度标定的基础上，通过检测细胞培养液先将裸玻碳（GlassyCarbon，GC）电极用去离子水

中剩余铜离子浓度，推导出细胞在生长过程对铜离子冲洗，然后在麂皮上用2滋m、200nm和30nm的

的吸收量。最后讨论了汞膜修饰电极特点、培养基内AlO浆连续抛光，之后用去离子水冲洗，紧接着放入