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紫外-可见分光光度法的应用
定性分析方法
01
比较吸收光谱一致性
吸收光谱特征对比
对比吸收光谱的形状、肩峰、吸收峰数目、峰位和吸光系数。测定条件需保持一致,以确保数据的可比性。
吸收光谱不一致
吸收光谱不一致时,表明不是同一种化合物。
吸收光谱相同需进一步分析
吸收光谱相同,并不能完全确定是同一种化合物。
比较吸收光谱特征数据
最大吸收波长对比
对比最大吸收波长及其对应的吸光系数。
实例分析
氟胞嘧啶片在286nm有最大吸收,在245nm有最小吸收。
杂质检查方法
供试品与标准光谱比较
将供试品吸收光谱与标准吸收光谱进行比较。
供试品与药典值比较
将供试品吸收光谱与药典的值进行比较。
杂质检定实例
如甲醇中杂质苯的检定,乙醇在特定波长处吸光度的规定。
定量分析方法
02
单组分溶液定量方法
吸光系数法
操作:查手册得吸光系数,相同条件下测试样吸光度,按公式计算浓度。
标准对比法
操作:配制标准溶液和试样溶液,在最大吸收波长处测吸光度,通过两式相除计算浓度。
标准曲线法
原理:固定比色皿光程L,吸收定律为A=KC,以浓度C为横坐标,吸光度A为纵坐标绘制标准曲线。
标准曲线法测定步骤:
01
02
03
04
配制标准系列:用标准物质配制一系列不少于5种不同浓度的标准溶液。
测定标准系列的吸光度:选择合适的参比溶液,用最大吸收波长测定标准溶液吸光度
绘制标准曲线:以浓度C为横坐标,吸光度A为纵坐标绘制标准曲线。
确定供试品溶液浓度:按照相同实验条件和操作程序,测定试样溶液吸光度,在标准曲线上找到对应浓度,并乘于稀释倍数计算出供试品溶液的浓度。
二元组分溶液定量方法
等吸收波长消去法
高含量组分测定方法
差示分光光度法
操作:配制比试样溶液浓度稍低的参比溶液;
公式:ΔA=Ax-As=εL(cx-cs)。
THEEND
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