生物制药纯化工艺优化工程师岗位招聘考试试卷及答案.docVIP

生物制药纯化工艺优化工程师岗位招聘考试试卷及答案

生物制药纯化工艺优化工程师岗位招聘考试试卷

一、填空题（每题1分，共10分）

1.抗体纯化常用的亲和层析配体是______。

2.目标蛋白带正电时，应选择______型离子交换柱。

3.除菌过滤常用滤膜孔径为______μm。

4.凝胶过滤层析（SEC）分离依据是蛋白______。

5.低pH处理属于______（物理/化学）病毒灭活方法。

6.HPLC分析蛋白纯度常用______检测器。

7.冻干工艺中，冰晶升华的步骤是______。

8.超滤膜截留分子量（MWCO）单位通常是______。

9.层析柱装填后需验证______（如柱效）。

10.离子交换层析中，高盐浓度洗脱的原理是______。

二、单项选择题（每题2分，共20分）

1.下列不属于层析技术的是：

A.亲和层析B.离子交换层析C.电泳D.凝胶过滤

2.缓冲液配制应使用：

A.自来水B.超纯水C.蒸馏水D.矿泉水

3.抗体纯化第一步通常是：

A.ProteinA层析B.澄清过滤C.超滤浓缩D.离子交换

4.冻干预冻的核心目的是：

A.灭活病毒B.形成冰晶C.去除水分D.提高纯度

5.超滤跨膜压力（TMP）安全范围是：

A.0.1barB.0.1-1barC.1-5barD.5bar

6.凝胶过滤中分子量最大的蛋白：

A.最先洗脱B.最后洗脱C.无法通过D.与流速无关

7.属于物理病毒灭活的是：

A.低pHB.巴氏消毒C.表面活性剂D.超滤

8.HPLC分析蛋白浓度常用：

A.蒸发光散射B.UV-VisC.荧光D.质谱

9.反向层析固定相是：

A.极性B.非极性C.中性D.离子型

10.层析柱清洗不包括：

A.去除残留蛋白B.恢复柱效C.改变配体特性D.灭活微生物

三、多项选择题（每题2分，共20分，多选/少选不得分）

1.影响离子交换分辨率的因素：

A.缓冲液pHB.盐浓度C.流速D.柱高

2.纯化工艺验证内容：

A.重复性B.病毒去除率C.蛋白纯度D.回收率

3.病毒去除常用方法：

A.超滤B.低pHC.巴氏消毒D.阴离子交换

4.冻干优化参数：

A.预冻温度B.升华温度C.解析温度D.样品浓度

5.超滤优化要点：

A.MWCO选择B.流速C.压力D.缓冲液pH

6.亲和层析优点：

A.特异性高B.回收率高C.步骤少D.成本低

7.反向层析适合分离：

A.疏水性蛋白片段B.极性小分子C.核酸D.亲水性蛋白

8.缓冲液配制注意事项：

A.准确称量B.pH调节C.过滤除菌D.避光

9.层析柱清洗试剂：

A.NaOHB.盐酸胍C.乙醇D.去离子水

10.ProteinA层析注意事项：

A.控制上样量B.优化洗脱pHC.防蛋白聚集D.定期再生

四、判断题（每题2分，共20分，√/×）

1.ProteinA仅结合IgG的Fc段。（）

2.离子交换中，蛋白pI越接近缓冲液pH，结合越强。（）

3.SEC可测定蛋白分子量。（）

4.预冻温度越低，冻干速度越快。（）

5.MWCO越小，截留效果越好。（）

6.病毒灭活需无菌环境。（）

7.HPLC可分析蛋白纯度。（）

8.反向层析流动相为非极性。（）

9.层析柱用后可直接封存。（）

10.低pH灭活适用于多数蛋白。（）

五、简答题（每题5分，共20分，≤200字）

1.简述离子交换层析原理及核心步骤。

2.ProteinA亲和层析的关键优化参数。

3.冻干工艺主要步骤及目的。

4.病毒去除/灭活常用方法及验证要求。

六、讨论题（每题5分，共10分，≤200字）

1.重组蛋白回收率仅30%，分析原因并提优化方案。

2.如何延长ProteinA层析柱使用寿命？

---

答案

一、填空题答案

1.ProteinA（或ProteinG）

2.阳离子

3.0.22

4.分子量（或Stokes半径）

5.化学

6.UV-Vis（紫外）

7.升华

8.kDa（道尔顿）

9.柱效

10.竞争离子交换位点

二、单项选择题答案

1.C2.B3.B4.B5.B

6.A7.B8.B9.B10.C

三、多项选择题答案

1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ABCD5.ABCD

6.ABC7.AB8.ABCD9.ABCD10.ABCD

四、判断题答案

1.×2.×3.√4.×5.×

6.√7.√8.×9.×10.√

五、简答题答案

1.原理：利用蛋白带电性差异，与离子交换树脂可逆结合，通过盐浓度/pH变化洗脱目标蛋白。步骤：①树脂平衡；②上样结合；③低盐洗杂；④高盐/变pH洗脱；⑤树脂再生。

2.①上样量：≤树脂饱和容量的80%；②缓冲液pH：上样中性（pH7.0），洗脱低pH（3.0-4.0）；③流速：0.5-1.0mL/min；④洗脱体积：确保完全洗脱；⑤再生：0.1-0.5MNaOH清洗。

3.①