电转化法制备大肠杆菌感受态细胞（适配 pBR322 质粒）具体步骤.docxVIP

电转化法制备大肠杆菌感受态细胞（适配pBR322质粒）具体步骤

电转化法制备的感受态细胞活性远高于CaCl?法，转化效率可达10?~10?CFU/μgDNA，适配pBR322质粒的大批量克隆与高要求实验。核心原理是通过高压电击在细胞膜上形成瞬时微孔，使质粒DNA进入细胞，关键操作是全程无盐、低温、轻柔操作（盐离子会导致电击时电弧放电，烧毁细胞与仪器）。以下是分步骤的标准化实操流程，附精准参数与注意事项。

一、实验准备（核心：无盐、无菌、预冷）

1.试剂与耗材（均需无核酸酶、无盐污染）

菌株：重组酶缺陷型大肠杆菌（如DH5α、JM109，基因型recA?、endA?），优