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病理切片染色不良应急演练脚本

演练场景设定

某三甲医院病理科常规技术组，上午9:15，技术人员正在进行当日手术标本的HE染色操作。当日标本量较大，共接收手术标本126例，其中包括3例心脏移植供心活检标本、2例颅内肿瘤标本（临床高度怀疑胶质瘤，需快速明确诊断指导后续手术方案）、15例胃肠道内镜活检标本，以及其他常规手术标本。此时，9:15完成染色的第一批12例标本（含2例颅内肿瘤标本）经封片后，由技术组组长张磊在显微镜下进行质控复核，发现所有切片均出现染色不良问题：细胞核着色浅淡模糊，细胞质嗜酸性染色不均，部分切片出现片状脱片，其中1例颅内肿瘤标本的肿瘤区域几乎无细胞核着色，仅残留淡粉色细胞质背景。

演练时间线及具体动作

9:15问题识别与初步响应

张磊（技术组组长，具备10年病理技术工作经验）在OlympusBX53显微镜下观察第1例颅内肿瘤切片时，第一反应是调整显微镜焦距和光源强度，反复转动微调旋钮后，仍无法看清细胞核形态，随即调取同批次的另一例颅内肿瘤切片，发现同样存在细胞核着色浅淡的问题。他立即放下手中的玻片，走到染色机旁，取出刚完成染色还未封片的2例胃肠道活检标本，直接在显微镜下湿片观察，结果显示细胞核呈淡蓝色，细胞质嗜酸性颗粒模糊，排除封片环节导致的问题。

“所有人暂停手中操作，立即到染色区集合！”张磊的声音沉稳但带着紧迫感，正在进行脱水、包埋的4名技术人员迅速停下手中工作，围拢到染色机旁。张磊展示了质控异常的切片和湿片观察的标本：“第一批HE染色的所有切片都出问题了，核染浅淡，胞浆不均，还有脱片。现在马上启动染色不良应急预案，所有人按分工行动！”

技术组组员李萌（负责试剂配制与设备维护，具备6年工作经验）立刻拿出《病理技术应急处理手册》翻到HE染色不良处置章节，同时打开电脑调取染色机的操作日志；组员王佳（负责标本接收与信息核对，具备3年工作经验）立即联系取材组，告知第一批染色标本异常，暂停将已取材的标本送入脱水机，同时记录第一批异常标本的编号、临床信息及标本类型；组员赵伟（负责切片与封片，具备5年工作经验）将已封片的12例异常切片重新整理，标注“染色异常待处理”，放入专用待复检盒，并准备好未染色的白片，随时准备重染。

9:20原因排查与分析

张磊牵头组成临时排查小组，按照“试剂-设备-操作流程”的顺序逐一排查：

1.试剂排查：李萌首先检查苏木素和伊红试剂。苏木素试剂为3天前配制的Harris苏木素，按照科室标准配制流程，使用前需经过氧化成熟。她取出苏木素染液，倒入比色皿中，用分光光度计检测其吸光度值，科室标准Harris苏木素吸光度应为0.5-0.7，实际检测结果为0.28，远低于标准值。随后她打开苏木素染液的储存瓶，发现瓶底有少量黑色沉淀，液面漂浮着一层灰白色薄膜，这是苏木素未充分氧化、媒染剂结合不良的典型表现。

接着检查分化液和返蓝液：分化液为1%盐酸酒精，李萌用pH试纸检测其pH值为1.2，符合科室标准（1.0-1.5）；取一滴分化液滴在载玻片上，观察到苏木素染液滴入后迅速褪色，说明分化能力正常。返蓝液为0.5%氨水，pH值检测为10.1，符合标准（9.5-10.5），滴加在分化后的切片上，能快速使苏木素染液变蓝，返蓝功能正常。伊红染液为水溶性伊红，检测吸光度为0.42，符合标准（0.4-0.6），取一滴伊红染液滴在白片上，干燥后呈现鲜艳的粉红色，排除伊红试剂异常。

2.设备排查：李萌调取染色机的操作日志，显示第一批标本的染色程序为“常规HE染色程序”，苏木素染色时间为5分钟，分化时间30秒，返蓝时间2分钟，伊红染色2分钟，所有时间参数与日常操作一致。她打开染色机的舱门，检查染液缸的液位，苏木素染液缸的液位刻度显示为2.5L，而科室规定染液缸液位低于3L时需补充染液，这一情况被记录在3天前的设备维护日志中，但当时负责补充试剂的组员因临时处理包埋盒编号错误，未及时补充苏木素染液。

随后她启动染色机的“缸体温度检测”功能，苏木素染液缸的温度为22℃，符合标准（20-25℃）；检查染液循环系统，打开循环泵后，苏木素染液能在缸体内均匀流动，无堵塞情况；检查染液滴沥装置，标本架从苏木素缸取出后，滴沥时间为10秒，符合程序设置，无染液残留过多或过少的情况。

3.操作流程排查：张磊询问负责第一批标本染色操作的组员刘畅（具备2年工作经验）：“你操作染色机时，有没有注意苏木素染液的状态？有没有调整过程序参数？”刘畅回忆道：“早上开机时，我检查了各染液缸的液位，苏木素缸确实快到最低刻度了，但想着昨天刚用分光光度计测过吸光度是0.62，就没补充，直接启动了程序。操作过程中没有调整任何参数，都是按常规程序走的。”

张磊立刻调取昨天的试剂检测记录，发现昨天上午9点的苏木素吸光度检测值为0.61，符合标准，但昨天下午