2.2.2微生物的选择培养和计数+课件+2024—2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

二微生物的选择培养和计数;一、选择培养基(实验室中微生物的筛选);这对我们要筛选某种微生物的启发？;灭菌的金丝绒;讨论1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？;;

由于土壤中细菌的数量庞大，要想得到能分解尿素的细菌的纯培养物，必须要对土样进行充分稀释，然后再将菌液涂布到制备好的选择培养基上，也就是要采用稀释涂布平板法。;稀释涂布平板法;③取0.1mL菌液，滴加到培养基表面;待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30~37℃的恒温培养箱中培养1~2d。

在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。;②当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌

通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。;③为了保证结果准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。

④样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目。在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为30~300、适于计数的平板。

⑤在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。;土壤中分解尿素的细细菌的分离与计数;【资料一】土壤取样

细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大多数分布在距地表3~8cm的土壤层。取样时一般要铲去表层土。

在城市，常见的是公园里、街道旁、花盆中的土壤；在农村，则容易收集到农田或菜园里的土壤。;【资料三】微生物的培养与观察

不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。

细菌一般在30~37℃的温度下培养1~2d。

可以每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。

在相同的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征。请仔细观察你所分离到的菌落，最好以表格的形式将不同菌落的特征(如形状、大小和颜色等)记录下来。;4.结果分析与评价

(1)结合对照组，分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出一些菌落。

(2)你是否获得了某一稀释度下菌落数为30?300的平板？

在这一稀释度下，是否至少有2个平板的菌落数接近？

(3)你统计的每克土样中能分解尿素的细菌数是多少？

与其他同学统计的结果接近吗？

如果差异很大，可能是什么原因引起的？;组别;三、微生物的数量测定;为统计发酵液中微生物的数量，采用了两套方案：

Ⅰ.取适量发酵液稀释105倍后，取0.1mL稀释液________(填“涂布”或“连续划线”)在平板上，25℃培养7d后，各平板的菌落平均数为45个。由此方案可知发酵液中微生物密度约为___________个/mL。

Ⅱ.取1mL发酵液与1mL红细胞溶液(含4×107个红细胞)均匀混合，在显微镜下观察到如下视野。可推知发酵液中微生物密度约为____________个/mL;三、微生物的数量测定;(1)过滤待测水样用到的滤杯、滤膜和滤瓶需事先进行_______处理，与过滤有关的操作都要在_______________旁进行。

(2)过滤后，将滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于_________操作。从功能角度分析EMB培养基属于________培养基。

(3)某同学在无菌操作下将10mL待测水样加入到90mL无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数平均为124，紫黑色菌落数平均为31，则推测1L待测水样中的大肠杆菌数目为_________

(4)大肠杆菌扩大培养时，用摇床振荡培养的目的是_______________

(5)以上方法的统计结果比实际值_____，原因是___________________________;4.比浊法

由于菌悬液中的单细胞微生物的细菌浓度与光密度成正比，与透光度成反比，可以借助分光光度计，在一定波长下，测定菌悬液的光密度，进而将未知细胞的菌悬液的光密度与已知细胞数的相比，就可以换算出未知菌悬液所含的细胞数。;瘤胃;2.地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%~60%能被土壤中某些微生物分解与应用利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。

使人们能够利用秸秆等生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。

刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红与纤维素形成红色复合物；而当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的