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微生物的培养技术及应用（一）

学习目标

1．概述培养基的营养构成，举例说明不同微生物营养需求的差异；

2．总结无菌技术的原理、常用设备及方法。

学习过程

【新课导入】

微生物在自然界随处可见，一滴水中就可能有几百万乃至数亿个细菌，并且属于很多不同的种类。实验室培养微生物时，如何才能让某种微生物大量繁殖，同时不被其他杂菌污染呢？

【新知讲解】

内容一：培养基的配制

1．人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质—培养基，用以、

、、微生物或其代谢物。其中，不含（如）、呈液体状态的培养基为液体培养基，呈固体状态的培养基为固体培养基。微生物在琼脂固体培养基或生长，可以形成肉眼可见的。

思考1：液体培养基和固体培养基的用途有什么不同？

2．各种培养基的配方不同，但一般都含有、、和等营养物质。

3．培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如，在培养乳酸杆菌时，需要

在培养基中添加；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至；在培养细菌时，一般需要将培养基调至；在培养厌氧微生物时，需要提供的条件。

思考2：用液体培养基培养需氧型微生物时，如何避免细胞沉降至培养基底部导致缺氧？

【学以致用】

例1：下列关于微生物培养基的说法，不正确的是()

A．牛肉膏主要给微生物提供碳源、磷酸盐和维生素

B．培养硝化细菌可以不加有机碳

C．微生物都可以利用琼脂作为碳源

D．固体培养基常用于菌种的鉴定和分离

内容二：无菌技术

巴氏消毒法是一种用于牛奶等不宜进行高温灭菌的液态食品的消毒方法，由法国微生物学家巴斯德发明。如，将牛奶在62~65℃消毒30min或80~90℃处理30s~1min，灭菌效率可达97.3%_99.9%，既保证了食用安全，也基本避免了营养物质和风味的损失。

思考1：为什么有些牛奶可以常温保存，有些却要低温冷藏？

你还知道哪些可以杀死微生物的方法？完成下表。

消毒

灭菌

概念

使用较为的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部微生物

使用的理化方法杀死物体内外的微生物，包括和。

种类

①消毒：在100℃煮沸5~6min，可

①灭菌：以的效果最好。实验室常用

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以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢。

②消毒：适用于不耐高温的液体，在63~65℃消毒30min或72~76℃处理15s或80~85℃处理10~15s，可杀死绝大多数微生物。

③消毒：用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等。

④消毒：如接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可以用紫外线照射30min，以杀死物体表面或空气中的微生物。

高压蒸汽灭菌锅，以水蒸气为介质，在压力为kPa、温度为℃的条件下，维持15~30min。

②灭菌：将灭菌物品放入密闭容器如干热灭菌箱，160~170℃的热空气中维持1~2h。适用于耐高温的和需要保持干燥的物品，如器皿（如吸管、培养皿等）、用具等。

③灭菌：将微生物的接种工具，如涂布器、接种

环、接种针或其他金属用具，试管口、瓶口等容易被污

染的部位，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧。

思考2：培养基灭菌应选用哪种方法？

【学以致用】

例2：微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，请分析下列操作，正确的有()

①培养基、锥形瓶都要进行干热灭菌②家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌处理③干热灭菌可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢④平板划线时所用的接种环需灼烧灭菌⑤家庭制作泡菜并无刻意的灭菌环节，发酵中期乳酸菌产生的乳酸可以抑制其他微生物生长

A．①④B．②⑤C．②③D．④⑤

【课堂小结】

学习过程答案

【学以致用】

例1：【答案】C

例2：【答案】D

一、单选题（本题共4小题）

1．下列关于培养基中营养物质的说法，正确的是()

A