Y微生物的培养技术及应用（二）.docxVIP

第1页

微生物的培养技术及应用（二）

学习目标

1．说出微生物纯培养的基本步骤；

2．掌握无菌操作、倒平板和平板划线的操作要点。

学习过程

【新课导入】

过去家庭制作馒头时，会留下一小块发酵的面团，用作下次发面的发酵剂，称作“面印子”、“面起子”等。而现在家庭制作发面食品时，一般都会选择市售干酵母作为发酵剂。酵母粉菌种纯净，具有发酵力好，效果稳定等优点。如何选育出稳定的酵母菌呢？

【新知讲解】

内容：微生物的纯培养

1．微生物的纯培养：接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。由 繁殖所获得的微生物群体称为，获得纯培养物的过程就是。微生物的纯培养包括 、、、和等步骤。

2．酵母菌的纯培养

（1）制备培养基：配制培养基→灭菌→倒平板：待培养基冷却至左右时，在附近倒平板。

倒平板的具体步骤：

①拔出锥形瓶的棉塞。

②将瓶口迅速通过火焰。

③用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基（10~20mL）倒入培养皿，立即盖上皿盖。

④等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置。

思考1：为什么要将培养皿倒置？

（2）接种和分离酵母菌。采用法：通过在培养基表面的操作，将

的菌种到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到。

具体步骤：

①将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环的金属丝烧红。

②在火焰旁冷却接种环。同时，拔出装有酵母菌培养液的试管的棉塞。

③将试管口通过火焰。

④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液。

⑤将试管口通过火焰，并塞上棉塞。

⑥在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖。

⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连。

思考2：为什么每次划线前都要灼烧接种环？

（3）培养酵母菌

将接种后的平板和一个的平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24~48h。

【学以致用】

例：如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述错误的是()

第5页

A．对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒处理

B．步骤①倒平板操作过程中，用食指和拇指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，防止周围环境中杂菌的污染

C．步骤③应多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落

D．步骤③划线结束后在培养皿盖上做好标注，培养皿需要倒置培养

【课堂小结】

学习过程答案

【学以致用】

【答案】D

一、单选题（本题共4小题）

1．关于倒平板的具体描述正确的是()

①待培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板

②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞

③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰

④用左手的拇指和食指完全打开皿盖

⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖

⑥等待平板冷却5~10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上

A．①③④⑤B．④⑤⑥

C．③⑤D．①②④⑥

【答案】C

【解析】①等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，防止杂菌污染，①错误；

②不能将灭过菌的培养皿放在桌面上，因为桌面上可能有杂菌，②错误；

③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，高温可防止杂菌污染，③正确；

④倒平板时皿盖只需要打开一条缝隙，在酒精灯火焰旁进行，④错误；

⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，并通过酒精灯火焰，⑤正确；

⑥等待平板冷却5～10分钟，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，⑥错误。

2．如图表示配制纯化酵母菌的培养基的一个环节。下列相关叙述正确的是()

A．该环节为倒平板，正确的操作顺序是：丙→乙→甲→丁

B．甲、乙、丙中采取的防止杂菌污染的方法是灼烧消毒

C．甲步骤需要培养液温度降至30℃左右才能进行，以免烫伤手指

D．丁步骤中需要将平板倒置的主要目的是防止水分的蒸发【答案】A

【解析】A．倒平板的操作：拔出锥形瓶的棉塞（丙）→将瓶口迅速通过火焰（乙）→用拇指和食指将培养皿打开一条略大于瓶口的缝隙，将培养基倒入培养皿（甲）→等待培养基冷却凝固后将培养皿倒过来放置（丁），