食品生物工程下游技术课件.pptxVIP

食品生物工程下游技術;一、概述;1.1生物工程下游技術的特點;;1.2下游工程的基本路線;;目的產物提取與精製過程的一般工藝流程;內容;二、原料與預處理;發酵液的預處理;2.1加熱升溫法;2.2凝聚與絮凝;2.3調節發酵液pH;內容;三、固液分離和細胞破碎;3.1.1離心分離;3.1.2過濾分離;3.1.2.1壓力過濾;3.1.2.2真空過濾;3.1.2.3錯流過濾;3.2細胞破碎;3.2.1常用的細胞破碎方法;3.2.1.1高速珠磨法;3.2.1.2高壓勻漿破碎法;3.2.1.3超聲破碎;3.2.1.4生物酶溶法;3.2.2包含體的處理;①包含體的分離

用溶菌酶或超聲波法處理基因工程菌，破碎細胞，離心取沉澱，得包含體。再用蔗糖溶液、尿素緩衝液或溫和的表面活性劑沖洗包含體，清除附在包含體上的雜蛋白、DNA、RNA和酶，得到較純的包含體。

②包含體的溶解

用弱變性劑尿素和表面活性劑十二烷基磺酸鈉溶解包含體，使蛋白質肽鏈分離。加入還原劑二巰基蘇糖醇或GSH，使二硫鍵可逆地斷裂。此時重組蛋白呈現可溶解和單體肽鏈的狀態。

③蛋白質的複性

變性蛋白經初步純化濃縮以後，透析除去變性劑和還原劑。大部分蛋白質即重新折疊，被空氣中的氧氧化，重建二硫鍵，恢復活性。

;內容;四、初步純化;4.1萃取;4.1.1溶劑萃取;4.1.2超臨界二氧化碳流體萃取;;超臨界二氧化碳流體萃取裝置;4.1.3雙水相萃取;4.1.4反膠團萃取;反膠團萃取原理

是從主體水相向溶解於有機溶劑相中納米級的、均一且穩定的、分散的反膠團微水相中的分配萃取。可當作“液膜”分離操作的一種。其特點是表面活性劑能不斷包圍水相中的蛋白質，形成反膠團，並引導入有機相中，完成對蛋白質的萃取和分離。在反膠團中蛋白質不與有機溶劑直接接觸，而是通過水化層與表面活性劑的極性頭接觸，從而避免了蛋白質的變性、失活。;;4.2吸附;4.2.1普通吸附劑吸附;4.2.2離子交換吸附;離子交換吸附的操作

（1）離子交換劑的處理加水浸泡，待充分膨脹後即可進行處理。常規的處理步驟是：加過量的水懸浮除去細顆粒，再改用酸堿浸泡，以便除去雜質並使其帶上需要的反離子。酸堿處理的次序決定了離子交換劑攜帶反離子的類型。在每次用酸（或堿）處理後，均應先用水洗滌至近中性，再用堿（或酸）處理。最後用水洗滌至中性，經緩衝液平衡後即可使用或裝柱。

（2）分離物質的交換使用離子交換劑的方法有兩種：一是柱色譜法，也叫動態法，即將離子交換劑裝入色譜柱內，讓溶液連續通過。該法交換效率高，應用範圍廣。另一種是分批法，也叫靜態法，即使離子交換劑置入盛溶液的容器內不斷緩慢攪拌。該法交換率低，不能連續進行，但需要的設備簡單，操作容易。

（3）物質的洗脫與收集洗脫條件和吸附條件相反，在酸性條件下吸附的在鹼性條件下洗。

（4）離子交換劑的再生使用過的離子交換劑，可採用一定的方法令其恢復原來的性狀，這一過程叫做再生。再生可以通過上述的酸、堿反復處理完成。;4.3沉澱;4.3.1鹽析沉澱法;4.3.2有機溶劑沉澱;;4.4膜分離;透析分離;內容;五、精細純化;5.1層析;5.1.1凝膠層析;凝膠色譜基本原理;5.2電泳;5.3分子蒸餾;液體混合物沿加熱板自上而下流動，被加熱後能量足夠的分子逸出液面，輕分子的分子運動平均自由程大;重分子的分子運動平均自由程小。如果在離液面距離小於輕分子運動的平均自由程而大於重分子運動的平均自由程處，設置一冷凝板，此時氣體中的輕分子能夠到達冷凝板，並不斷地被冷凝，從而破壞了體系中輕分子的動態平衡，而使混合液中的輕分子不斷逸出;相反，氣相中的重分子因不能到達冷凝板，很快與液相中的重分子趨於動態平衡，表觀上重分子不再從液相中逸出，這樣液體混合物便達到了分離的目的。下圖為分子蒸餾的原理示意圖，其主要結構由加熱器、捕集器、高真空系統組成。

;六、成品加工;6.1結晶技術;6.2濃縮;冷凍濃縮法;6.3乾燥;噴霧乾燥;思考題