重组DNA技术的基本工具——高中生物人教版选择性必修3第三章 .docxVIP

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重组DNA技术的基本工具

学习目标

阐明重组DNA技术所需的三种基本工具及各自的作用。

学习过程

【新课导入】

番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。当番木瓜被这种病毒感染后，产量会大大下降。科学家培育出了转基因番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒。DNA双螺旋的直径只有2nm，对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。那么，科学家究竟用到了哪些“分子工具”？这些“分子工具”各具有什么特征呢？

【新知讲解】

内容一：限制性内切核酸酶——“分子手术刀”

1．基因工程是指按照人们的愿望，通过__________等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看，由于基因工程是在__________水平上进行设计和施工的，因此又叫作__________技术。

2．基因工程的原理：基因重组。

3．切割DNA分子的工具是________________，简称___________。

（1）来源：主要是从___________中分离纯化出来。

（2）种类：数千种。

（3）作用：识别___________的___________，并且使每一条链中特定部位的___________断开。大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，也有少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。

（4）结果：产生_______末端或_____末端。当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA分子的两条链分别切开时，产生的是___________；当限制酶在它识别序列的__________处切开时，产生的是平末端。思考：限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么？

【学以致用】

例1：下图甲、乙、丙为限制酶切割形成的黏性末端（相关限制酶均识别6个核苷酸的序列）下列说法错误的是()

A．甲、乙、丙黏性末端分别是由不同的限制酶切割产生的

B．甲、乙具有相同的黏性末端，可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能

C．限制酶的作用位点是b处

D．限制酶主要从原核生物中提取

内容二：DNA连接酶——“分子缝合针”

（1）作用：DNA连接酶能够催化___________的形成，将两个________连接起来。

（2）种类：

①E.coliDNA连接酶：从________中分离得到。

②T4DNA连接酶：从__________中分离出来。

这两类酶都能将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键，但E.coliDNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远低于T4DNA连接酶。

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（3）比较DNA连接酶与DNA聚合酶

DNA连接酶

DNA聚合酶

不同点

是否需要模板

__________

__________

作用DNA链数

__________链

__________链

作用过程

连接两个__________

将__________加到已存在的DNA单链

片段上

作用结果

将已存在的DNA片段拼接成新的

DNA分子

合成新的DNA分子

相同点

都是催化____________键的形成

内容三：基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

1．载体的种类

（1）常用载体：_________，它是一种_______的、结构简单、独立于真核细胞_______或原核细胞__________之外，并具有__________能力的_________双链DNA分子。

（2）其他载体：__________、__________等。

2．载体具备的条件

（1）有一个至多个__________，供外源DNA片段（基因）插入其中。

（2）能在受体细胞中进行__________，或整合到受体DNA上，随受体DNA__________。

（3）有特殊的_______基因，如抗生素抗性基因，便于重组DNA分子的筛选。

（4）对受体细胞无毒害作用。

思考：天然质粒可以直接用作外源基因的载体吗？

【课堂小结】

学习过程答案【学以致用】

【答案】C

一、单选题（本题共4小题）

1．基因工程至少需要三种“分子工具”，下列有关这三种工具的说法，正确的是()

A．这三种工具酶分别是限制酶、DNA连接酶和基因的载体

B．DNA连接酶发挥作用时需要识别黏性末端的脱氧核苷酸序列

C．重组质粒只有整合到受体细胞的染色体DNA上才能完成DNA复制

D．限制酶只作用于磷酸二酯键，不作用于氢键【答案】D

【解析】A．基因工程至少需要三种“分子工具”，分别是限制酶、DNA连接酶和基因的载体，三种工具只有两种是酶，