【毕业论文】共振散射测定米托蒽醌的含量.docVIP

【标题】共振散射测定米托蒽醌的含量 【作者】汤从国 【关键词】????共振散射???米托蒽醌???赤鲜红?　 【指导老师】周 尚 【专业】化学 【正文】1?引言米托蒽醌(MXT)[1]等蒽环类药物是一类重要的抗癌类抗生素。它们的作用机制是通过与DNA?分子直接作用，嵌入DNA，改变DNA的模板作用，阻止并干扰DNA聚合酶的活性以及DNA和RNA的合成，使癌细胞不能分裂增殖。此类抗生素主要用于乳腺癌、白血病及恶性淋巴癌等的治疗，但这些药物都有一定的骨髓和心脏毒性[ 2~3?]?，所以对这类药物的血药浓度分析和痕量测定无论对于药物分析还是临床医学均是十分必要的。目前对于蒽环类抗生素的测定方法使用较多的是高效液相色谱，此外电化学方法、免疫分析法、流动注射化学发光法[4]和薄层色谱法[5]也有研究和应用。近年来，共振瑞利散射(RRS)[6]?作为一种新近发展起来的新光谱分析技术，被用于测定某些蒽环类抗生素，有较高的灵敏度。相比之下用于测定蒽环类抗生素的光谱分析研究较少[7]，仅有少数分光光度法[ 8?]和荧光法[ 9-10]用于某些蒽环类抗生素的测定，但多数灵敏度较低，选择性欠佳。目前用于蒽环类抗生素测定的荧光分析法都仅限于测定其药物本身的荧光，其方法的灵敏度较低，因此进一步研究和发展测定蒽环类抗生素的灵敏度高、选择性好、简便、快速的分子光谱分析新方法是一件有意义的工作，需要发展一种新的高灵敏度的光度法用于蒽环类抗素的测定。共振光散射技术是一项在普通荧光分光光度计上进行测量的光散射分析技术，共振光散射技术是通过同时扫描激发和发射单色器获得光散射信号而建立的一种技术。?然而，传统的单波长共但在分析化学中尚未得到充分的应用，尤其在荧光测定中散射光常作为一种干扰源而被消除，随着科学技术的进步，仪器的精密度的提高，共振散射越来越受到人们的重视，其简便的操作步骤和极高的紧密度，使得其在日常中受到广泛的应用。我们在实验中发现，米托蒽醌在适当的缓冲介质中与赤鲜红作用，应用共振散射法检测，发现其共振散射光强度有明显的变化。由此建立了间接灵敏测定蒽环类抗生素的新方法。将此法应用于针剂样品的分析，结果满意。2　实验部分2. 1　主要仪器和试剂日立F-4500型荧光分光光度计(日本日立公司)?，UV-3010型紫外-可见分光光度计(日本日立公司)?，Ph-S20K型精密pH计(上海梅特勒-?托利多仪器有限公司)?。盐酸米托蒽醌(MXT，四川三精升和制药有限公司)?、配制浓度为20μg/ml的标准液，密闭、避光保存；赤鲜红：2. 5?×10-4 mg/L?；BR?缓冲溶液：用0.04 mol/ LH3PO4，0.04 mol/ L H3BO3和0.04 mol/ L CH3COOH与0.2mol?/L NaOH溶液按一定比例混合，配成不同pH值（4～7）的缓冲溶液，并用酸度计校正pH值。实验用水均为二次蒸馏水，其余试剂均为分析纯。2. 2　实验方法在10. 0 ml比色管中依次加入0.5 ml pH4.6?的BR缓冲溶液，1.0 ml的 2. 5?×10-4 mg/L?的赤鲜红溶液，20?μg/mlMXT溶液。加入每种试剂后混匀，最后用蒸馏水定容至10 ml，振荡摇匀，放置15 min。于1cm比色池中测定共振散射光光强度RRS，狭缝宽度均为10 nm，扫描速度为2400 nm?/ min。3　结果与讨论3. 1　共振散射光谱特征图１是不同体系的共振光散射光谱。在 pH 4.6的介质中，2.0μg/ml MXT、0.125mol/ml ET和PH=4.6缓冲溶液在 400～600 nm波长范围内具有宽而弱的共振光散射峰。当MXT、ET和PH缓冲溶液共存时，共振光散射光谱的形状发生了明显的变化，在524 nm处共振光散射峰明显的增强，说明MXT与ET发生了相互作用，据此可以建立定量测定MTX的新方法。?1.ET, 2. MTX,?ρ(MTX):2.0?μg/ml;?(3-7).(ET-MTX),ρ(MTX)(3-7): 0.2, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0?μg/ml;??ρ(ET): 1.25×10?- 4 mol/L; pH:4.6图１体系的共振光散射光谱3. 2　适宜的反应条件3.2.1?溶液酸度的影响　为考察溶液酸度对反应体系共振光强度的影响，实验了一系列的常用的缓冲溶液作反应介质时试剂空白都较高，效果一般。而当选用BR缓冲溶液按一定比例混合，配制成pH为4～7范围的缓冲溶液，试剂空白较低，进一步实验了pH在此范围内体系共振光强度的变化情况，pH对体系的共振光强度影响较大。当pH4.4～4.8范围内时，体系的共振光强度达到最大值且保持稳定。故实验选用的pH为4.6。此外，BR缓冲溶液