携带表达密码子优化的猪圆环病毒2型Cap蛋白真核质粒的重组沙门氏菌在猪体的免疫试验.docVIP

  携带表达密码子优化的猪圆环病毒 2 型 Cap 蛋白真核质粒的重组沙门氏菌在猪体的免 疫试验#  5 10 15 20 25 30 35 杨香林，白绢，姜平，王先炜** （南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室，江苏南京，210095） 摘要：猪圆环病毒 2 型（PCV2）是目前危害养猪业的 重要病原，可以引起包括仔猪多系统 衰竭综合征（PMWS）的多种疾病，目前尚无有效的治疗方法，只能依靠疫苗预防感染。本 研究将经过小鼠免疫试验筛选到的 表达修饰 Cap 蛋白的 真核质粒 pVAX-SynCap(m)转染减 毒沙门氏菌 SL3263 株（ SL），构建了重组沙门氏菌 SL-pVAX-SynCap(m) ，与质粒 pVAX-SynCap(m)、空质粒 pVAX1、SL 和 PBS 进行猪体免疫攻毒保护试验。 首免后 2 周， PCV2 抗体阴性，首免后 5 周 pVAX-SynCap(m)和 SL-pVAX-SynCap(m)抗体水平分别为 1:150 和 1:280，但均未检测到中和抗体，而其他组 PCV2 抗体和中和抗体均为阴性。用 PCV2 SH 株攻毒后，SL-pVAX-SynCap(m)及 pVAX-SynCap(m)组仅出现短时间的 发热，临床症状较轻， 相对日增重明显高于攻毒对照组(P0.05)，其中 SL-pVAX-SynCap(m)免疫组在病毒血症、淋 巴结病毒载量和病理组织学变化方面明显轻于攻毒对照组。该研究结果表明，减毒沙门氏菌 作 为 载 体 后 提 高 了 质 粒 pVAX-SynCap(m) 对 猪 体 的 免 疫 保 护 作 用 ， 重 组 沙 门 氏 菌 SL-pVAX-SynCap(m)对猪体具有较好免疫保护作用，为研究有效预防 PCV2 感染的 口服疫苗 奠定了基础。 关键词：携带；猪圆环病毒 2 型；Cap 蛋白；真核质粒；沙门氏菌；猪体免疫试验 中图分类号：S855.3 The immunogenicity of the recombinant S.typhimurium containing the plasmid pVAX-SynCap(m) expressing the codon-optimization Cap protein of PCV2 in piglets YANG Xianglin, BAI Juan, JIANG Ping, WANG Xianwei (Key Laboratory of Animal Diseases Diagnostic and Immunology, Ministry of Agriculture, College of Veterinary Medicine,Nanjing Agriculture University, Nanjing 210095, China) Abstract: The Cap protein was the major immune protein of PCV2, a pathogene which endangered the pig industry in the world. In this study, the recombinant plasmid pVAX-SynCap(m) expressing the codon-optimization Cap protein was transformed into the attenuated S.typhimurium strain SL3263 by electroporation, resulting in a strain SL-pVAX-SynCap(m). To detect the immunogenicity of the plasmids DNA pVAX-SynCap(m) and the recombinant bacteria SL-pVAX-SynCap(m)，the piglets were divided into five groups and vaccinated with the plasmids pVAX-SynCap(m) and pVAX，the bacteria SL-pVAX-SynCap(m) and S.typhimurium strain SL3263 and PBS. The results showed that the pigs vaccinated with the recombinant S.typhimurium and recombinant plasmid developed specific anti-PCV2 antibody by ELISA, but no n