对骨桥蛋白(OPN) 基因与动物繁殖性能的相关性的研究.docVIP

对骨桥蛋白（OPN）基因与动物繁殖性能的相关性的研究 刘庆雨，张树敏，金 鑫，李 娜，李兆华，赵晓东，张志彬 （吉林省农业科学院，公主岭 136100） 摘要：骨桥蛋白是一种重要的组织营养物质，在动物生殖过程中发挥着重要作用。本文就OPN的分子结构、OPN的生物学功能、OPN基因的表达调控以及OPN基因多态性与动物繁殖性能的关系作一综述。 关键词：骨桥蛋白；动物；繁殖性状 骨桥蛋白又名骨调素，是富含唾液酸及多个糖基化位点的磷酸化蛋白，属于细胞外基质蛋白的一种，其分子量在66Kd左右，首次由Franzen等在骨基质中发现，因其在骨组织细胞之间及细胞与基质之间的连接左右而被命名为骨桥蛋白，其早期也被人称为骨唾液酸蛋白1、磷蛋白1、淋巴蛋白活性1及骨延蛋白1等[]。骨桥蛋白在妊娠初期的胚胎着床、血管细胞的重建、肿瘤的生长及转移、骨生成及代谢等多种生理及病理功能都有着重要作用，因此很多研究认为骨桥蛋白也是一种细胞因子。 1.1 骨桥蛋白的分子结构 骨基质蛋白主要由胶原蛋白及非胶原蛋白两种成分构成，骨桥蛋白则是非胶原蛋白中的重要成分之一，骨桥蛋白的分子内部含有多个精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)序列，该序列是细胞黏附分子的特有结构，对不同种类的细胞具有一定的黏附能力，MILLSEN等的研究发现含有RGD序列的骨桥蛋白可以促进成骨细胞的黏附、分裂、增殖及分化等。骨桥蛋白主要通过与其受体结合发挥作用，骨桥蛋白的受体分为整合素受体蛋白及 CD44两大类，整合素受体蛋白一般只由α亚基及β亚基构成，与骨桥蛋白结合的整合素受体有αVβ1、αVβ3、αVβ5、α4β1、α9β1，其中αVβ3是与骨桥蛋白结合的主要受体。骨桥蛋白与不同的整合素受体结合发挥不同的作用[2]，研究发现骨桥蛋白与αVβ1、 αVβ5结合将促使平滑肌细胞黏附，而与αVβ3的结合将促进该细胞的转移。相关研究也表明受体αVβ3与骨桥蛋白的结合具有一定的钙依赖性，骨桥蛋白与该受体之间的作用受到钙离子浓度的调节。受体CD44是一类位于细胞膜表面的粘性糖蛋白受体，该受体与骨桥蛋白结合作用于多种细胞，促进细胞发挥重要功能。如骨桥蛋白只有与CD44受体结合才能对IL-3依赖细胞的凋亡具有一定的拮抗作用[3]。 骨桥蛋白分子中具有与凝血酶及部分金属蛋白酶作用的酶切位点，该位点通常被称为RS位点，RS位点位于RGD下游6个氨基酸处。凝血酶可将骨桥蛋白分子酶切成45KDa和24KDa两个多肽片段[4,5]，将C端的作用位点和N端的受体结合位点进行分离，将此位点上的RGD序列释放出来，使45KDa的多肽片段比骨桥蛋白更能刺激细胞的黏附和迁移[6]。 骨桥蛋白分子通常以磷酸化OPN及非磷酸化OPN等多种形式存在组织及细胞中，磷酸化修饰对于骨桥蛋白的作用及活性都将产生重要的影响。 骨桥蛋白广泛分布于人、牛、猪、鸡、兔、小鼠、大鼠等多种动物中，不同种属动物来源的OPN具有高度同源性，氨基酸序列大小在264~314个氨基酸之间，这些物种中氨基酸的相似度在35%~86%之间，但都有包括N末端的信号肽序列、C末端的连续ASP序列及50个氨基酸RGD和酪氨酸激酶磷酸化识别序列的高度保守序列。研究表明人的骨桥蛋白基因位于4q13染色体上，长度为8kb左右，包含7个外显子（exon）及6个内含子（Introns），而小鼠与猪的骨桥蛋白基因都由6个exon及5个Introns构成，小鼠的OPN基因定位在5号染色体上。 1.2 OPN的表达调控 骨桥蛋白广泛分布于动物机体的多个组织细胞中，OPN最早在牛的成骨细胞及破骨细胞中被发现，随后又发现骨桥蛋白可在肝、睾丸、胎盘、胰腺、骨、肾、肺、卵巢等组织和骨细胞、巨噬细胞、成骨细胞、破骨细胞、软骨细胞、激活的T细胞和病理状态下的癌细胞等多种细胞中表达。 骨桥蛋白基因受多种因素的调控：（1）炎症反应期间，IL-1、TNF-α和PDGF可以通过活化PKC而刺激OPN的表达；（2）肝素结合表皮生长因子（HB-ECF）、孕激素（MPA）能够引起骨桥蛋白表达量上调[7]；（3）适宜浓度的水草酸钙(calcium oxalate monohydrate,COM)对大鼠的肾小管上皮细胞刺激后，该细胞中的骨桥蛋白表达量增强，但过高浓度的COM会损坏上皮细胞，而导致骨桥蛋白表达量降低[8]。（4）H2O2能在基因水平上调节血管平滑肌细胞(VSMC)的OPN的表达[9]；（5）脂多糖(LPS)可作用于腹膜间皮细胞( RPMC)，刺激该细胞内的骨桥蛋白表达量增加[5]；（6）高纳盐能够对肾或培养的肾细胞中OPN表达增强，而缺钠也将减少肾中骨桥蛋白的表达。 1.3 骨桥蛋白的生物学功能 1.3.1 骨桥蛋白作为调控因子参与动物创面损伤的修复过程[10]。