安宫牛黄丸对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1基因表达及髓过氧化物酶活性的影响.pdfVIP

广州巾医药大学学报 年 月第 卷第 期‘ , . . .中药药理? 安宫牛黄丸对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白 基因表达及髓过氧化物酶活性的影响 张 丹, 胡质毅, 黄 萍, 李 俊, 王艳丽 广州中医药大学,广东 州 摘要:【目的】观察安宫牛黄丸对盲肠结扎穿孔术致脓毒症模型大鼠肺组织高迁移率族蛋白表达及 髓过氧化物酶活性的影响 【方法】 只雄性 大鼠随机分为正常对照组,脓毒症模型组 组 ,【一氰 基一 , 羟基 一苄苯乙烯胺组组,术前. 皮下注射 / 的 激酶抑制剂 』, 雷帕霉素组 组,术前 . 皮下注射 . 的信号转导和转录激活子抑制剂,安宫 牛黄丸低、中、高剂量纽 术前. 和术后 按. 、. 、 ./ 剂量灌胃 。于造模后 活杀动物,留取肺组 织,采用逆转录一聚合酶链反应 ? 法检测肺组织表达水平,同时测定活性~【结果】与正 常对照组比较, 组肺组织 表达显著增强 .,活性显著增高 .与组比 较.组、 组以及安宫牛黄丸低、中、高剂量组 表达显著下调 ., 组、组 以及安宫牛黄丸低、中剂量组活性显著降低 . 或.、【结论】安宫牛黄丸治疗脓毒症的作用与 、等 信号通路抑制剂相似,可下调肺组织 基因表达,降低肺组织活性,减轻腹腔感 染所致的急性肺损伤一 关键词:安宫牛黄丸/药理学; 脓毒症/中药疗法; 基因表达调控; 疾病模型,动物; 大鼠 中图分类号: . 文献标志码: 文章编号:? ? ?高迁移率族蛋门是严重感染所 南京建成科技有限公司提供 批号:, 致脓毒症的重要晚期介质,参与了包括肺脏、肝一氰基一 , 一羟基 一苄苯乙烯胺 为 脏、肠道在内的多器官损害过程 。。肺组织髓过 美国 产品,宙帕霉素氧化物酶活性呵定量反映肺组织中性粒 为美国 产品,总提取试剂 细胞扣押与聚集的数日,在一定程度上 盒为 本公司产品,逆转录一聚合酶链反 反映肺组织的炎症损伤程度 。本研究旨在观察 应 ? 试剂盒为立陶宛 肓肠结扎穿孔致脓毒症大鼠肺组织 公司产品,型可见光分光光度计为尤尼 表达的变化规律,及安宫牛黄丸对肺组织 柯 上海 仪器有限公司产品。 表达和炎症损伤指标活性的干预作用 . 动物模型制备 健康雄性 大鼠 只,体 并探讨其可能作用机理,为寻找中医药干预脓毒症 质量 ~ ,购自广东省医学实验动物巾心, 的有效途径提供依据。现报道如下。 合格证号:。在 报道的方法 的基础上进行改良,复制腹腔感染型脓毒血症。术 材料与方法 前禁食 ,用 水合氯醛按/ 的 . 主要药物、试剂与仪器 安宫牛黄丸由北京 剂量腹腔注射麻醉大鼠,常规消毒腹部,在下腹部 同 堂股份有限公司同堂制药厂生泣 批号: 正中央切¨,长约 ,打开腹腔寻找占肠,小 ,水合氯醛由罔约集团化学试剂有限公司 心分离其远端与大肠的系膜,寻找盲肠与小肠及大 生广: 批号: ,活性检测试剂盒由 肠交界处,用灭菌 号丝线环形结扎。在与肠系膜 收稿 期:? ? 作者简介:张丹 一 ,女.教授 基金项目:困家 然科学基金资助项日 编 : 广州中医药大学学报 年第 卷 相对的盲端肠壁浆膜面用 号针头穿刺 次, 个结果 针孔相距约,第 针孑 距盲端约,同时 各组对脓毒症大鼠肺组织表达 在第 针孔处放置 条宽的橡胶引流片,防 及活性的影响见表 、图 。与正常对照组比 止伤口愈合,轻轻将肠管放回原处,关闭腹腔,逐 较,组大鼠肺组织表达显著增 层缝合。术后即刻皮下注射生理盐水,补充手术过 强 .,而 活性显著增高 程中体液的丢失,剂量/ 。 .。与组比较,组、 组以及安 . 动物分组与给药只大鼠随机分为正常对 宫牛黄丸低、中、高剂量组表达均 照组,脓毒症模型组, 组, 显著下调 .,而组、 组以及 组,安宫牛黄丸低、中、高剂量组。 组于术 安宫牛黄丸低、中剂量组活性显著降低 前 . 皮下注射/ 的 激酶 . 或尸 .。尽管安宫牛黄丸高剂量组与抑制剂?? ,组于术前 , 组比较有降低的趋势,但差异无显著性意义 皮下注射 . / 的信号转导和转录激活子 .。 抑制剂??雷帕霉素,安宫牛黄丸低、 中、高剂量组分别于术前 .和术后 按 . 、 表 各组对脓毒症大鼠肺组织 . 、 . / 剂量灌胃安宫牛黄丸,正常对照组、 表达及活性的影响 ± 组、 组和组动物灌胃等容积蒸馏 水。. 标本采集和处理 于造模后 活杀动物, 无菌条件下取肺组织 置于液氮中保存。无菌 状态下,另取肺组织,加入 . 生理盐 水在冰浴下匀浆, / 离心,取上 清液。 . 检测指标和方法 . . 采用 法检测肺组织 表达水平 称取肺组织约 ,以异硫氰酸胍一 步法提取细胞总,扩增转录产物,以三