组织芯片技术和其在病理学研究中的初步应用.pdfVIP

维普资讯 20位年4月第 31卷第 2 ． 技 术 交 流 ． 组织芯片技术及其在病理学研究中的初步应用 刘卫平 张红英 郭嘉 李甘地 李俸媛 鲁昌立 廖殿英 王和 组织芯片又称组织檄阵列(d自uemlcroarray)是将数十 高组织片易离散 ，温度过低卿难以保证组织片的展开。用于 个、数百个乃至上千个小的组织片整齐地排列在某一载体上 免疫组织化学染色的组织片辕于经 10％APES的丙酮溶液处 (通常是载玻片)而成的微缩组织切片。组织芯片的特点有： 理的载玻片上 ，5CC烤片3h后移至 ℃恒温箱中过夜。常 (1)体积小、信息含量高、可根据不同的需要进行组合和设 温保存备用。 计；(2)不仅适用于形态学观察 ．还能用于免疫组织化学染 3．免疫组织化学染色：对多肿瘤组织芯片作了 [SAB法 色、原位杂交和各种原位组织、细胞学的观察和研究；(3)高 免疫组织化学染色 。用高压煮沸抗原修复。选用的抗体有 效、快速、低消耗、自身内对照和可比性强。在医学科学研究 细胞角蛋白(CK，1：100)、波形蛋白(vim，1：5o)和平滑肌肌动 中可单独或与基因芯片配套用于基因及其产物表达水平的 蛋白(SMA，1：5O)．均系DAKO公司产品；LSAB试剂盒购 白 分析和基因功能的研究，有广阔的应用前景。我们尝试了组 北京中山生物公司。每片每次滴加各种工作稀释液200m。 织芯片的制作。并在组织芯片上进行了数种抗体的免疫组织 DAB显色，苏木精衬染。用24mm×40r一盖玻片封片。 化学染色和原位杂交，取得了初步结果。 4．熙位杂交：用 DNA-KNA原位杂交技术检测侵袭性 一 、材料与方法 NK／T细胞淋巴瘤组织芯片上 EB病毒编码的小分子 mBNA。 (一)材料 主要步骤有：(1)蛋白酶K消化(3蟮／Ⅲ1)；(2)杂交用地高辛 1．尸体解剖：共2例，1个是意外死亡病例．共49个组 标记的寡桉苷酸探针(L ：0427)55~C，3h；(3)滴加 鼠抗地高 织样本．涵盖了人体各系统大多数器官组织；另 1倒是侵袭 辛单克隆抗体(Lot：333062) ℃过夜；(4)链霉紊抗生物紊． 性NK／T细胞淋巴瘤的尸体解剖病倒I有36个样本。 过氧化酶(孵)法免疫组织化学染色。所用试剂均赡 自北京 2．手术切除器官：数种良、恶性肿瘤及瘤旁组织共 104 中山生物技术公司。DAB 显色 。苏术精衬染。 个样本 ，组织来源上有食道、胃、肠、腹腔、肝、肺、子宫等，病 二、结果 理诊断为不同分化程度的腺癌、鳞癌及其癌旁组织、间皮瘤 1．组织芯片的质量 ：在载玻片上组织阵列的捧列整齐， 和子宫平滑肌瘤及甲状腺滤泡型腺瘤等。 正常人多组织芯片 (49个样本／片)上有 2片组织缺失 (--)方法 (4．1％)，2片组织有部分折叠 ，其余组织形态好。人多种实 1．组织处理 ：在组织离体后尽快用 4％的中性甲醛固 体瘤肿瘤组织芯片(104个样本／片，图2～4)上有 1片组织 定，固定时问为24h。组织取材厚3mm。行常规组织处理、 缺失(0．o9％)，各样本形态好，肿瘤 的组织学类型有子宫平 石蜡包埋 ，制成 目标蜡块 ，做 5肿 组蒡{切片，并进行常规苏 滑肌瘤32