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铜绿微囊藻、斜生栅藻生长的磷营养动力学特征
许 海1,杨林章2,茅 华1,刘兆普1 *
1. 南京农业大学资源与环境科学学院,江苏 南京 2100952. 中国科学院南京土壤研究所生态室,江苏 南京 210008
在无磷培养基中添加不同质量浓度的磷,对经过磷饥饿的铜绿微囊藻Microcystis aeruginosa和斜生栅藻Scendesmus obliquus进行一次性培养,比较研究磷饥饿下两种藻对外源磷的生长反应,并应用Monod方程计算了两种藻的营养动力学参数(Umax、Ks)。结果表明,铜绿微囊藻现存量快速增加的磷质量浓度在0.020~0.200 mg·L-1之间,比生长速率快速增长的磷质量浓度在0.00~0.200 mg·L-1之间,斜生栅藻现存量快速增加的磷质量浓度在0.02~4.00 mg·L-1之间,比生长速率快速增长的磷质量浓度在0.020~0.500 mg·L-1之间。无论在现存量上还是在生长速率上,铜绿微囊藻适宜的磷质量浓度都比斜生栅藻的低。铜绿微囊藻的最大生长速率和半饱和常数分别为0.229/d、0.026 mg·L-1;斜生栅藻的最大生长速率和半饱和常数分别为0.395/d、0.031 mg·L-1。生长动力学参数表明:当磷缺乏的情况下,铜绿微囊藻容易形成优势,当磷丰富的情况下,斜生栅藻容易形成优势。
磷;铜绿微囊藻;斜生栅藻;生长动力学X524 文献标识码:A 文章编号:1672-2175(2006)05-0921-04湖泊富营养化问题是当前我国主要的水环境问题之一,己严重制约了湖区社会和国民经济的可持续发展[1]。微囊藻是一类全球性分布的蓝藻,在我国大部分富营养化水体中,铜绿微囊藻Microcystis aeruginosa在数量和发生频率上均占优势。有磷在天然水体富营养化中起到非常重要作用,是湖泊水体中藻类生长的第一限制因子[2-3]。由于不同的藻类具有不同的需磷特征,因此磷的供应状况会导致水体藻类群落结构的演替。比增长率(umax)和半饱和常数(ks)是藻类在浮游植物群落种间竞争能力和演替顺序的指标[4]。通过比较不同藻类的umax和ks可以推测营养限制条件下藻类竞争的结果。本文以铜绿微囊藻和斜生栅藻为研究对象,比较研究磷胁迫下两种藻的Umax和Ks,为揭示水华暴发机理提供依据。
光照培养箱、显微镜、血球计数板、离心机等。试验所需所有玻璃仪器经清水冲洗后,在稀盐酸中浸泡30 min,以无菌水冲洗,烘干备用。
试验用铜绿微囊藻,斜生栅藻购自中科院武汉水生生物研究所。BG-11培养基的配制硝酸钠(NaNO3) 1.5 g·L-1磷酸氢二钾(K2HP04) 40 mg·L-1硫酸镁(MgS04) 75 mg·L-1氯化钙(CaCL·2H20) 36 mg·L-1柠檬酸6 mg·L-1,柠檬酸铁6 mg·L-1乙二胺四乙酸钠1 mg·L-1碳酸钠(Na2C03) 20 mg·L-1氯化锰(MnCl2·4H20) 1.81 mg·L-1硫酸锌(ZnS04·7H20) 0.22 mg·L-1钼酸钠(Na2Mo04·2H20) 0.39 mg·L-1硫酸铜(CuS04·5H20) 0.079 mg·L-1硝酸钴(CoNO3·6H20) 0.049 mg·L-1。
整个试验以上述培养基为基础,配制成无磷培养基,按试验所需质量浓度加入相应量的磷(K2HP04),磷质量浓度设置为0,0.002,0.020,0.200,0.500,1.000,4.000,8.000 mg·L-1 。
藻种试验前扩大培养1周,再饥饿培养3 d。取一定体积的藻种以 r/min的速度离心弃掉上清液,用15 mg·L-1的碳酸氢钠溶液洗涤后离心重复3次用无菌水稀释后用于接种。其起始的藻密度在5.0×104 m·L-1左右。
生物量测定采用分光光度计测出培养液在663 nm处的吸光度。
特定增长率(u)指在某一时间间隔内藻类生长的速率,计算公式:u=ln(X2/X1)/ t2-t1
式中,X2为某一时间间隔终结时的藻类现存量;X1为某一时间间隔开始时的藻类现存量,t2-t1为某一时间间隔。
将Monod方程式U=Umaxc/(c+Ks)变成以下形式:c/U= Ks /Umax+c/Umax
式中U为微生物的比增殖速度,Umax为在饱和质量浓度中微生物最大比增殖速度,c为溶液中限制微生物增殖的底物质量浓度;Ks为半饱和常数,其值为U=Umax/2时底物质量浓度。以统计学的最小二乘法的程序求出上述方程的斜率1/Umax和截距Ks/Umax,斜率的倒数为Umax,其与截距的乘积即为半饱和常数Ks。
表1 不同磷质量浓度(Cp)下两种藻的比生长速率(u)
Table 1 Spe
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