痕量铁双波长双指示剂催化动力学光度法测定.pdfVIP

l534 中国公共卫生2009年 12月第 25卷第 12期 ChinJPublicHealthDec2009Vo1．25No．12 文章编号：1001-0580(2009)12-1534-02 中图分类号：O657．32 文献标志码 ：A 【检验技术】 痕量铁双波长双指示剂催化动力学光度法测定 葛笑兰，谢秀娟，张振新 关键词：铁；痕量铁检测 铁是人体中必不可少的微量元素，对于人体的生理功能， 罗丹明B反应有明显催化作用。故实验选用560和670nm 营养，保健等方面均有重要的作用。因此，研究铁的测定方法 作为测定波长。 非常必要。目前催化光度法测定微量铁的报道很多 “ ，但 2．2 醋酸和醋酸钠缓冲溶液pH值的选择 按实验方法确 大多都是使用单指示剂。本研究通过实验发现，在醋酸和醋 定醋酸和醋酸钠缓冲溶液的pH值。结果表明，醋酸和醋酸 酸钠的缓冲溶液中，Fe3强烈催化双氧水氧化次甲基蓝及罗 钠缓冲溶液的pH值在4．5～5．5之间时 ，催化反应效果最为 丹明B的反应，通过检测560和670llm外吸光度变化的加和 明显，△A值基本处于一个平台，故本实验选用醋酸和醋酸钠 性和浓度和线性关系，建立了双波长双指示剂催化动力学光 缓冲溶液的pH值为5．0。 度法测定铁的新方法。 2．3 醋酸和酸酸钠用量的选择 按实验方法确定醋酸和醋 1 材料与方法 酸钠缓冲溶液的用量 ，结果表明，缓冲溶液用量为5．0mL时 1．1 主要仪器与试剂 FA2004型电子天平 (上海 良平仪器 催化反应效果最为明显，△A值最大，故本实验选用硫酸用量 仪表有限公司)；722S型分光光度计(上海精密科学仪器有限 为 5．0mL。 公司)；HH一6数显恒温水浴锅 (国华电器有限公司)。铁标 2．4 双氧水用量的选择 按实验方法确定双氧水用量。结 准溶液：用干燥的硫酸铁铵准确配制成含铁 1．0000g／L的 果表明，双氧水用量 4．0mL，△A随着用量的增加而增大 ； 储备液，用时再稀释成 1~g／mL的标准溶液。醋酸和醋酸钠 4．0mL，随用量的增加而减少，故本实验选用双氧水用量 缓冲液 (pH5．0)；0．O1％次甲基蓝溶液；0．01％罗丹明B溶 为4．0mL。 液，6％H：O2溶液。以上所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水。 2．5 反应时间的选择 按实验方法固定其他条件和试剂用 1．2 实验方法 取25mL带塞玻璃比色管2支，分别加入次 量，确定反应时间。结果表明，8min，随着时间的增加，吸 甲基蓝 1．0mL，罗丹明B溶液 1．2mL，醋酸和醋酸钠的缓冲 光度差值逐渐增大。8mill，吸光度差值基本保持不变。本 溶液5．0mL，双氧水溶液4．0mL，于其中1支比色管内加入 实验选反应时间为 8min。 一 定量的铁离子标准溶液(催化体系、吸光度为A 和A，。)， 2．6 反应温度的选择 按实验方法固定其他条件和试剂用 另 1支比色管内不加铁离子标准溶液 (非催化体系，吸光度 量确定反应温度。催化反应和非催化反应体系在室温下均不 为A∞60和A 。)，然后，2支比色管内均 以水定容至刻度，摇 反应，80℃时，反应均缓慢进行；80℃时，催化反应迅速 匀，同时放人沸水浴中加热8rain，立即取出，用 自来水冲淋冷 加，温度在 100℃时，催化反应效果最好，△A最大，故本实验 却4rain，然后移入 lcm比色皿中，以蒸馏水为参比，在分光 选择反应温度为 100℃加热8min后用流水冷却4min。 光度计上于560和670nlll波长处测定吸光度A和An。分别计 2．7 次甲基蓝和罗丹明B明量的选择 按实验方法固定其 算△A姗 A仿60一A560，△A670=A晡70一A670，△ =△ 鲫 +A670。 他条件和试剂用量，当次甲基蓝取量为 1．0mL时，罗丹明 1．3 样品分析 称取 2．0