人TRBP基因在HEK-293细胞中的表达.pdfVIP

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MedUniv)2009,30(21) http://www,fmnmxb,cn 2263 第四军医大学学报(JFoortlMjJ — — — — · 研究原著 · 文章编号 :1000—2790(2009)21-2263-03 人 TRBP基因在 HEK-293细胞 中的表达 李俊堂 ,王立锋 ,王 芳。,许彦鸣 ,ga~-4~ (第四军医大学基础部:生物化学与分子生物学教研室,。免疫学教研室,陕西 西安 710033) Expression ofhuman TRBP gene in 真核表达载体.转染 HEK.293细胞后提取蛋白,经电泳观察 到在Mr46000存在与 目的蛋白分子质量相符的条带,该条带 HEK-293ceils 可被抗TRBP多克隆抗体及抗FLAGmAb特异性识别.结论: LIJun—Tang ,WANGLi—Feng ,WANGFang ,XU Yah—Ming , TRBP哺乳动物表达系统的建立 ,为进一步研究TRBP的生物 YANGAn—Gang , 学效应奠定了基础. DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology, Department 【关键词】TARRNA结合蛋 白;pFLAG—CMV4;基 因表达; of Immunology, Fourth Military Medical University, Xi’an HEK一293细胞 710033.China 【中图号】Q78 【文献标识码】A 【Abstract】AIM :Toconstructeukaryoticexpressionvector O 引言 carryinghumanTRBP(TAR RNA—bindingprorein)geneand RNA一度被认为仅仅是DNA和蛋 白质之间的 expressitinHEK-293 cells.METHODS:RT.PCR wasusedto “过渡”,但越来越多的证据清楚的表明,RNA在生命 obtainhumanfull—lengthTRBP eDNA ,Then itwasclonedinto theeukaryoticexpressionvectorpFLAG—CMV4.Aftertransfeetion 的进程 中扮演的角色远 比我们早前设想的更为重要. intoHEK一293cellsthrough lipofectamine2000 transiently .the RNA干扰(RNAinterference)的发现使得人们对RNA expressionoftargetgenewasdetectedbyindirectimmunofluores—

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