人参皂苷生物合成和次生代谢工程.pdfVIP

中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology，2009，29(10)：102～108 人参皂苷生物合成和次生代谢工程 术 吴 琼 周应群 孙 超 陈士林 (中国医学科学院／北京协和医学院药用植物研究所 北京 1000193) 摘要 人参皂苷属于植物三萜皂苷类化合物，是传统名贵药材人参和西洋参的主要活性成分，具 有抗炎、抗氧化作用，还有广泛的抗肿瘤作用。人参皂苷与植物 甾醇共享前期代谢途径，通过2， 3氧化鲨烯环化步骤进入三萜代谢分支途径，在三萜碳环骨架复杂修饰的基础上形成人参皂苷。 综述了近年人参皂苷生物合成途径及关键酶基因研究的最新进展，揭示了人参皂苷生物合成的 基本途径，对途径中关键酶的基因进行了综述，并结合次生代谢工程技术，探讨了该技术在人参 皂苷生物合成 中的应用前景。 关键词 人参皂苷 生物合成 关键酶 代谢工程 中图分类号 Q819 人参皂苷 (ginsenoside)是五加科 (Araliaceae)植物 作为原初供体，经过甲羟戊酸 (Mevalonate)中间物合成 人参 (Panaxginseng)和西洋参 (Panaxquinquefolium)的 异戊 烯焦磷 酸 (IPP)和二 甲基 烯丙 基焦磷 酸 主要活性成分 。迄今为止已经发现的人参皂苷约有 (DMAPP)；(2)通过烯丙基转移酶 (prenyltransferase) 40余种，然而作为人参皂苷的主要来源，人参、西洋参 和萜类环化酶的催化合成2，3-氧化鲨烯；(3)2，3一氧 需要4～15年的生长栽培阶段，生产上 由于连作障碍 化鲨烯依次经过环化、羟基化、糖基化对三萜碳环骨架 和病虫害的困扰，其品质及其生长环境受到严重限制； 进行复杂修饰，最终形成达玛烷型和齐墩果酸型人参 同时，具有独特药理活性的人参皂苷含量稀少，如 R 、 皂苷 。 Rb2、Rh2等抗癌成分含量甚微 J。近年来，植物次生 1．1 IPP和DMAPP的合成 代谢工程发展迅速，应用分子生物学和基因工程方法， 首先两分子乙酰辅酶A在乙酰辅酶A酰基转移酶 在微生物中重建药用次生代谢物生物合成途径 已有初 (AACT)催化下缩合生成乙酰乙酰辅酶A(acetoacetyl- 步的研究和实践。随着三萜皂苷生物合成途径及其关 CoA)，随后在 HMG—CoA合成酶(HMGS)化下继续与一 分子乙酰辅酶A缩合形成 3一羟基-3一甲基戊二酰辅酶A 键酶的研究不断取得进展，为通过次生代谢工程手段 (HMG—CoA)，上述反应需要Fe 和质体醌(quinone)的 生产稀有人参皂苷奠定了基础。深入揭示人参皂苷的 协助完成 (图1)。在NADPH的协助下，3．羟基．3．甲 生物合成途径，构建适宜的微生物表达体系，对大规模工 基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)催化HMG—CoA生成 业化生产人参皂苷具有重要意义，鉴于缺乏相关报道，本 6碳中间体 甲羟戊酸 (mevalonate，MVA)，这一步是 文综述了人参皂苷生物合成途径及其关键酶基因研究的 MVA途径中的第一个关键步骤 。在ATP的存在下，甲 最新进展，并探讨了人参皂苷生物合成的前景。 羟戊酸激酶 (MVK)和磷酸甲羟戊酸激酶(PMK)依次 1 人参皂苷的生物合成途径 催化 MVA生成磷酸 甲羟戊酸 (mevalonatephosphate， MVAP)