TLR2基因多态性及其与奶牛乳房炎的相关分析.pdf

第 37卷 第 9期 西北农林科技大学：报 (自然科学版) Vo1．37 No．9 2009年 9月 JournalofNorthwestAFUniversity(Nat．Sci．Ed．) Sep． 2009 TLR2基因多态性及其与奶牛乳房炎 的相关分析 刘 利 ，黄金 明 ，王长法 ，王洪梅 ，李秋玲 ，李建斌 ，张嘉保 ，仲跻峰 (1山东省农业科学 院奶牛研究 中心 ，山东 济南 ，250100；2吉林大学 实验动物中心 ，吉林 长春，130062) [摘 要] 【目的】研究牛 Toll样受体蛋 白2基因 (孔 j2)的多态性及其与中国荷斯坦奶牛乳房炎的关系 。 【方 法】以中国荷斯坦奶牛、鲁西黄牛和渤海黑牛为研 究对象 ，利用 DNA测序 、PCR—RFIP和创造酶切位 点 RFIP(CRS- RFIP)技术对 TLR2基 因多态性及其与 中国荷斯坦奶牛乳房炎 的关系进行研 究。 【结果】经 DNA 测序 ，在牛 TLR2 基因的3非翻译区发现 1个新的SNP，即mRNA序列的3008位发生 了T／C突变 。TLR2基因编码区(c．651GA， c．827AG)和 3 }翻译区(c．3008T~C)有 3个突变位点，分别是 PstI，HinllI和 HhaI限制性 内切酶的酶切多态 位点。3个多态位点在各品种牛之间的基 因型频率和等位基 因频率差异较大 ；经 Y2适合性检验 ，除鲁西黄牛的HhaI 酶切位点处于非 Hardy—Weinberg平衡状态外 ，3种牛在其他位 点均处于 Hardy—Weinberg平衡状态 (P0．05)。只有 HiM Ⅱ酶切多态位点与牛乳 中的体细胞评分 (SCS)存在相关性 ，含有 B等位基 因的个体 SCS显著低于含有 A等位 基 因的个体 (PO．05)。中国荷斯坦奶牛在 3个酶切位点形成 了 H1 H8共 8种单倍型，产生 了H1HI、H1H2、 H1H3、HlH4、H1H7和 H1H8等 6种单倍型组合 ，其 中H1H1的频率最高 (55．89 )，H1H4的 SCS最低 (3．17)，且 不 同单倍型组合与 SCS存在相关性 。 【结论1TLR2基 因可斥作奶牛抗乳房炎性状 的辅助选择标记 。 [关键词] 牛；乳房炎；TLR2基因；体细胞评分；单倍型 [中图分类号] $823．2 [文献标识码] A [文章编号] 1671-9387(2009)09—0045—08 Therelationshipbetweenpolyrnorphism Of7]Lf=72geneand mastitisindairycattle IIU Li一，HUANGJin—ming ，WANG Chang—fa，WANG Hong—mei，LIQiu—ling ， LIJian—bin ，ZHANGJia-bao ，ZHONG Ji—feng (1CentreofDairyCattleResearch，ShandongAcademyofAgriculturalScience，Ji’nan，Shandong250100，China； 2Centreo，ExperimentalAnimal，，ilinUnivI~rsitv，Changchun，，ilin13O062，China) Abstract：[Obiective]Thepolymorphism of丁LR2genewasstudiedanditsassociationwithmastitis inChineseHolsteinwasanalyzed．[Method]Threebovinebreeds，includingChineseHolstein(331)，Luxi cattle(66)andBohaiBlackcattle(3O)，wereusedasexperimentalexamplesbydirectsequencing，PCR—RFLP andCRS—PCRmethods．[Result]Onenew singlenucleotid