基于纳米操纵技术的单分子DNA分子手术：切割、拾取及连接酶分子传递.pdfVIP

第 29卷 第 8期 分析测试学报 V0l_29No．8 2030年 8月 FENXICESHIXUEBAO(JournalofInstrumentalAnalysis) 787～791 基于纳米操纵技术的单分子 DNA分子手术 切割、拾取及连接酶分子传递 周化岚，邹 忠，吴 莎，施文健 (上海理工大学 环境与建筑学院，上海 200093) 摘 要：该文利用一种基于原子力显微镜 (AFM)抬高模式(Liftmode)的 “逐线反馈纳米操纵”技术成功地 进行了DNA单分子水平上的切割、拾取及连接酶分子的传递 ，系统地完成了DNA的分子手术。在切割和拾 取过程中，以PBR322／PstIDNA为研究对象，进行了单分子水平上的切割，实验发现由于 DNA分子本身弹 性，切割过程极易出现切割端变粗的现象。在分子传递过程中，分别以T4DNA连接酶和小牛胸腺组蛋白分 子为研究对象，实现针尖和基底表面之间的分子传递。同时通过控制针尖运动成功获得连接酶分子点阵排列 及小牛胸腺组蛋白方块状纳米结构。结果表明利用此操纵方法可以获得很高的精确度 ，切割 DNA时的空间 精确度小于5nm。系列单分子水平上的分子手术的整合为实现单分子水平上生化反应 ，甚至构造智能机器提 供了可能。 关键词：纳米操纵；单分子DNA；切割；拾取 ；分子传递 ；原子力显微镜 中图分类号：0766．1；Q783．2 文献标识码：A 文章编号：1004—4957(2010)08—0787—05 doi：10．3969／j．issn．1004—4957．2010．08．006 SingleMoleculeDNA Nan0manipulati0nTechniques：Dissection，Pick—up andMolecularTransferringofLigase ZHOUHua-lan，ZOUZhong，WUSha，SHIWen-jian (SchoolofEnvironmentandArchitecture，UniversityofShanghaiforSciencenadTechnology，Shanghai 200093，China) Abstract：W iththeappearanceanddevelopmentofscanningprobemicroscopytechniques，itwas possibletomanipulatesinglemolecule．Asthecorematerialoflifeandcarriersofgeneticinforma— tion，singleDNA moleculecontinuestoattractwidespread interestamongresearchers． Itissignifi— canttocarryoutsinglemoleculeDNA nanomanipulationsincludingdissection，pickupandmolecular transferring． Inthispaper，dissection，pick—up andmoleculetransferringweresuccessfullycarried outbyusingtheline—by-linefeedbacknanomanipulationundertheAFM Liftmode．Dissectionand pickupprocessweredonebyusingPBR322／PstIDNAasobjectivemolecule．Experimentalresults showedthedissection endsofDNA molecule becamelargerduetotheelasticityofDNA molecule． Also，T4DNA ligasemoleculescouldbe transferred fro