快速测定花生油中的黄曲霉毒素B1.pdfVIP

技术 Technique·油脂工程 快速测定花生油中的黄曲霉毒素 B．． 刘艳琴 王 浩 (国家食品质量安全监督检验 中心) 摘【要】建立了花生油中黄曲霉毒素B的高效液相色谱一串联四极杆质谱联用测定方法。该方法经 甲醇提 取样 品 ，以 SB—C18柱 (2．1x5Onun，3．5m)分 离 ，流 动相 为 O．1％甲酸水 溶液 和 甲醇 (梯度 洗 脱)，电喷雾正 离子MRM 模式检测 。该方法 的栓 出限 O．2p,g／kg，线性 范 围O．10~25．01．zg／L，加标 回收率 85．8％~101．3％，相 对标 准偏差 为 5．70％。 关【键词】液质联用仪；黄曲霉毒素B；花生油 中图分类号 ：TS227 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000—9868(2011)12—0058—03 黄 曲霉毒素是黄 曲霉 、寄生 曲霉及温特 曲霉等产毒 1．1_2 试剂和材料 菌株的代谢物 (后者产量较少)，是一群结构类似的化合 甲醇 (色谱纯)；甲酸 (色谱纯)；黄曲霉毒素 B： 物 。AFB1属剧毒物质，其毒性 比氰化钾还高，也是 目前 Supelco公司，浓度为 11~g／mL，纯度为 99％。 最强的化学致癌物，故其在食品中允许量各国都有严格规 中间浓度标准溶液 ：20ng／mL。准确吸取 lmL标准 定。FA0／WHO规定食品中AFB1≤15~g／kg，美国≤20 储备液于 50mL容量瓶 中 ，用 甲醇稀释至刻度 。该溶液 kg，日本≤lOl~gk／g，以色列与瑞典规定不得检出。我国 于4℃保存 ．可使用 3个月。 根据不同的食品类别也制定相应的AFB1食品卫生标准。 基质混合标准工作溶液 ：根据仪器的灵敏度和线性 目前 ，对食品中黄 曲霉毒素的检测方法主要有薄层 范 围，吸取一定量的中间浓度标准溶液 ，用空 白样 品提 色谱法 (TLC)、酶联免疫吸附法 (ELISA)和高效液相 取液配成系列浓度的基质混合标准工作溶液。当天配 色谱法 (HPLC)。薄层色谱法操作繁琐 、污染大、定量 制 。 差及耗时长；而酶联免疫法虽操作简单灵敏度高 ，但特 1．1．3 样 品 异性差。普通的HPLC结合荧光检测的方法黄 曲霉毒素 花生油样品购 自本地超市。 需要经过免疫亲和柱净化以后才能进行测定 ，操作繁琐， 1-2 分析条件 分析时间长 ，消耗的溶剂量 比较大 。 1_2．1 色谱条件 本文通过 甲醇液液萃取花生油中AFB1，旋转蒸发 色谱柱 ：ZORBAXSB—C18柱 3．5m，2．1mmxl5Omm； 富集萃取液后 ，采用高效液相色谱一质谱联用技术对花 流速 O．25mL／min；柱温 30~C；进样量 201xL；流动相 A 生油 中AFB1进行定性和定量分析 ，检 出限为 0．2g／， 为含0．1％甲酸的水溶液．流动相 B为甲醇 ；洗脱梯度程 完全满足了世界各国对花生油中AFB1的限量要求 。结 序见表 1。 果表 明：该法是检测花生油 中AFB1的一种快速 、灵敏 、 表 1 分离黄 曲霉毒紊 B 的较佳洗脱梯度 准确和经济的检测方法。 1 试验部分 1．1 试验仪器 ，试剂 ，样品 1．2．2 质谱条件 1．1．1 仪器 离子源为 电喷雾离子源 (ESI)；扫描方式为正离子 液相色谱一串联质谱仪 ：Agilent6410型串联三重四 扫描；检测方式为多反应检测 ；干燥气N：；雾化气压力 极杆质谱，配Agilentl200型液相色谱仪 (Agilent公司， 275．8kPa：干燥气温度 340c=【：干燥气流速 8Lm／in。黄 曲 美国)。