华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞增殖及周期的影响.pdfVIP

206 ·论 著 · October2011，Vo1．9，No．28 华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞增殖及周期的影响 孙 宇 卢辛辛 梁鑫淼 崔晓楠 (1大连医科大学第一附属医院肿瘤科，辽宁大连 116002；2 中科院大连化学物理研究所，辽宁大连 116023) 【摘要】目的 探讨华塘素注射液对人肝癌HepG-2细胞增殖及周期的影响。方法 应用噻唑蓝还原法 (MTT)检测华蟾素注射液对 HepG-2 细胞增殖的影响；应用流式细胞术 (FCM)检测HepG一2细胞周期分布；采用逆转录一多聚酶链反应技术 (RT-PCR)检测华蟾素注射液对 HepG一2细胞CyclinA和 CDK2mRNA表达水平的影响；应用比色定量法检测华蟾素注射液对 HepG一2细胞 内CDK2及CyclinA活性的影 响。结果 华蟾素注射液可以抑制HepG一2细胞增殖，其抑制作用具有时间和剂量依赖性；可将HepG2细胞阻滞于S期；抑制HepG一2细 胞 CDK2、CyclinAmRNA水平表达；使HepG一2细胞CyclinA、CDK2活性降低。结论 华蟾素注射液能够抑制人肝癌HepG-2细胞增殖， 并将细胞阻滞于S期 ，诱导细胞凋亡，机制可能是通过影响CyclinA、CDK2活性 ，下调CDK2、CyclinAmRNA水平表达实现的。 【关键词】华塘素注射液；肝癌 ；CDK2；CyclinA；细胞周期 中图分类号：R735．7 文献标识码：B 文章编号：1671-8194 (2011)28-0206-03 ProliferationInhibitionandCellCycleArrestofHumanHepatomaHepG’。2CellInducedbyCinobufaciniInjection SUN Yu，LUXin-xin，LIANGXin．miao，CUIXiao—nan十 (JDepartmentofOnocology,theFirstAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116011，China； 2DalianInstituteofChemicalPhysics,ChineseAcademyofScience~Dalian116023,China IAbstractlObjectiveTostudytheeffectofcinobufacininjectionontheproliferationandcellcycleofhumanhepatomaHepG一2cel1．MethodsCell proliferationwasanalysedbyMTTassay；Flowcytometry(FC^ wasemplayedtodetecttumorcellcycledislribution；ExpressionofCyclinA，CDK2mRNAlevels inHepG-2cellswasanalysedbyPT-PCR；QuantitativecolorimetricassaywasusedtoanalyseYCclinA／CDK2activityinHepG一2cells．ResultsCinobufacini injectionsignificantlyinhibitedHepG--2cellsproliferationindoses--andtimed··ependentways；FCManalysisexpressedcinobufacininjectioninducedcell cyclearrestatSphase；PT-PCRassayshowedcinobufacininjectiondownr·egulatedCDK2，CyclinAexpressionatmRNAlevels；Qunatitativecolorimetric assaydisplayedcinobufacininjectiondeceasedcyclinA／CDK2activityinHepG·2cells．ConclusionHumna hepotocarcinomaHepG-2cellgrowthcanbe ihni