常规植物石蜡制片技术的改进及应用.pdfVIP

36 安徽农学通报 ，AnhuiAgri．Sci．Bul1．2011，17(11) 常规植物石蜡制片技术的改进及应用 王 静 左 幸 黄正文 (1成都大学城乡建设学院，四川成都 610106；2二滩水电开发有限责任公司，四川成都 610051) 摘 要：石蜡切片技术在植物科学技术研究领域扮演着十分重要的角色，并为植物组织结构的研究做出了巨大贡献， 现代植物分子生物学研究中仍需石蜡切片技术支持。以凹叶木兰的雌、雄蕊群及花被 片作为实验材料 ，通过改 良脱 水、包埋、染色、分色等制片环节，设计了一种优 良、易操作的植物组织石蜡制片方法，并对实验操作中常见的问题和 注意事项进行了讨论。实验结果表明该方法简化 了实验步骤，节约了实验药品，减少了实验中有毒试剂的使用和接 触，提高了制片质量并使 同一批制片染色效果统一。 关键词：植物组织学；石蜡切片；改进和应用 中图分类号 Q94 文献标识码 A 文章编号 1007—7731(2011)11—36—04 ImprovementandApplicationofPlantParaffin Sectioning WangJinu (1CollegeofUrbanandRualConstruction，ChengduUniversity，Chengdu610106，China) Abstract：ParaffinSectioningnotonlyplaysanimportantroleinplantscienceresearch，butalsomakeatremendouscontri— butiontostudyingcompositionandsturctureofplant．Modernplantmolecularbiologystillneedsthetechnique．Thisstudy usedthegynoeeium，androecium，tepalsofMagnoliasargentianaasexperimentalmaterial，improvedtraditionalparaffinsec— tioning，suchasdehydration，embedding，stain，separation．Wediscussedtypitalproblemsandcautionitemsintheim— provedParaffinSectioning．Theexperimentalresultsthatthenew techniquesimplifiedtheprocessof paraffinsectioning， savedexperimentcost，reducedtouchingtoxicreagent，obtainedqualityslides． Keywords：Planthistoloyg ；Paraffinsectioning；Improvementamdapplication 近年来，随着新设备的出现，在经典石蜡切片技术的 成败 的主要原因包括：(1)制片周期长，一般从材料 固定 基础上，不断涌现出一些对植物组织结构研究的新技术 ， 到封片至少都要一周 以上；(2)脱水、透明、浸蜡、包埋的 如超薄切片、半薄切片、冰冻切片等技术 ¨。J，但这些方法 过程中操作不慎易使材料变脆、变硬或变形 ，从而影响染 都是在经典的石蜡切片技术上发展而来的。至今，石蜡切 色；(3)手续繁琐，染色前要脱蜡、水化处理，染色后又需 片法仍为制片技术的经典方法，在植物组织学、比较解剖 脱水、透明；(4)脱蜡后的切片在水化和脱水时，植物组织 学、分类学、细胞学和发育生物学研究中得到广泛应用。 常由于对载玻片的粘附能力降低而脱落，特别是诸如孢 此外 ，石蜡切片法能与其他新技术结合应用于免疫学、现 子、花粉及胚囊等孤立分散的细胞 ；(5)由于一般染料都 代植物分子生物学等学科中，如将免疫荧光检测技术与石 极易溶于酒精，故染色后脱水时，切片容易褪色，不易把握 蜡切片