化妆品动物替代实验的整合应用策略.pdfVIP

中国药理学与毒理学杂志２０１３年１１月第２７卷增刊１　ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ，Ｖｏｌ２７，Ｓｕｐｐｌ１，Ｎｏｖ２０１３ ·２３· 射电镜和荧光倒置显微镜下观察，可以看到高剂量下的单独染苯并［ａ］芘组、染铝组神经元细胞出现核膜皱 缩，胞质致密，核染色质边集等细胞凋亡的经典形态学变化；联合作用组均出现了明显凋亡形态学变化。② －１ －１ 细胞活力测定结果：与空白对照组相比，Ｂ［ａ］Ｐ４０ ｍｏｌ·Ｌ 组、Ａｌ（ｍａｌ）１００ ｍｏｌ·Ｌ 组及所有联合作用 μ ３ μ 组细胞活力降低（Ｐ＜０．０５），析因分析表明，Ｂ［ａ］Ｐ和Ａｌ（ｍａｌ）及联合对原代培养的神经细胞损伤的影响 ３ 有显著性意义。 细胞凋亡率测定结果显示，与对照组相比，低剂量单独染苯并［ａ］芘组、染铝组均没有统 ③ 计学意义（Ｐ＞０．０５）；高剂量单独染苯并芘、染铝组凋亡率差别有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；联合作用组各指 标差别均有明显统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论　铝和苯并［ａ］芘联合染毒对神经细胞凋亡具有联合作用， 作用类型为协同作用。 Ｔ１．２５　化妆品动物替代实验的整合应用策略 程树军，秦　瑶，潘　芳，黄健聪 （广东出入境检验检疫技术中心，广东 广州 ５１０６２３） 　　摘要：目的　根据检测机构服务于产品质量评估和提供技术支撑的特点，尝试建立整合应用策略。 方法　采用体外细胞培养、离体器官培养、重建组织工程皮肤模型等多种体外实验系统，采用组织培养、显微 呈像、分子生物学、荧光检测等建立体外方法。这些方法包括鸡胚绒毛尿囊膜血管试验（ＣＡＭＶＡ）、牛角膜 浑浊及通透试验（ＢＣＯＰ）、荧光素漏出实验（ＦＬ）、经皮肤电阻（ＴＥＲ）、小鼠淋巴结实验（ＬＬＮＡ）、直接多肽 结合实验（ＤＰＲＡ）、人细胞系激活试验（ｈＣＬＡＴ）、中性红摄取光毒性试验（ＮＲＵＰＴ）、红细胞光溶血实验 （ＲＢＣＰＴ）、鸡胚尿囊膜抗氧化试验（ＲＣＡＭ）、原代黑素细胞抑制酪氨酸酶实验（ＭＡＴＡ）、角质细胞摄取黑 素颗粒实验（ＫＩＭ）、角质细胞 Ｐ５３水平测试（ＰＰＫ）、基质金属蛋白抑制实验（ＭＦＩＫ）等。结果　眼刺激实验 采用ＣＡＭＶＡ和ＢＣＯＰ的组合可满足无刺激性到严重刺激性产品的测试；采用 ＦＬ和ＢＣＯＰ的组合可用于 含表面活性剂产品的测试。皮肤刺激实验采用经皮肤电阻（ＴＥＲ）和皮肤模型的组合，或采用ＣＡＭＶＡ和皮 肤模型的组合。光毒性实验采用 ＮＲＵＰＴ和 ＲＢＣＰＴ组合适用于光毒性原料的预测。皮肤过敏实验采用 ＬＬＮＡ方法判定或采用 ＤＲＰＡ＋ｈＣＬＡＴ的组合方法预测。抗氧化剂的配方开发采用 ＰＰＫ和 ＲＣＡＭ和 ＭＦＩＫ的组合，既可用于原料的开发，也可用于成品总体效果的测试，防晒剂的体外测试采用 ＮＲＵＰＴ和 ＰＰＫ的组合，可实现大样本的快速筛查。美白剂的开发采用 ＭＡＴＡ和ＫＩＭ等多种方法的组合可提供与机 制相关的可靠依据。结论　整合策略已经应用于化妆品的安全性评价过程，以及应用于原料或产品的功效 性宣称评估过程。不同方法的组合应用有效地减少和避免了实验动物的使用，为化妆品出口企业符合欧盟 动物实验禁令法规要求提供技术服务，同时了满足了部分企业的研发需求，提高了产品研发效率。 基金项目：国家科技支撑计划（２０１１ＢＡＩ１５Ｂ０３） Ｅｍａｉｌ：ｃｈｅｎｇｃｉｑ＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ Ｔ１．２６　ＳＥＴ在乳腺癌中的生物学作用 李　杰，任晓虎，黄培武，洪文旭，杨细飞，刘建军 （深圳市疾病预防控制中心现代毒理学重点实验室，广东 深圳 ５１８０５５） 　　摘要：目的　探讨ＳＥＴ基因对乳腺癌细胞转移及侵袭的影响。方法　培养 ＭＤＡＭＢ２３１细胞，利用 慢病毒介导的ＲＮＡ干扰技术构建ＳＥＴ缺陷表达的乳腺癌细胞株；利用ＭＴＴ吸光度与细胞数目之间的关系 绘制细胞生长曲线，并利用公式计算细胞倍增时间；采用划痕实验观察肿瘤细胞迁移能力的改变，并利用 Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ实验再次检测ＳＥＴ缺陷对肿瘤细胞迁移能力的影响；利用Ｔ