酿酒酵母PDC1 基因过表达菌株的构建.pdfVIP

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2013-08-25 DOI: 10.3724/SP.J.1145.2013.00704 / Chin J Appl Environ Biol 2013 19 ( 4 ) : 704-708 应用与环境生物学报 , * 酿酒酵母PDC 1基因过表达菌株的构建 1 2 1 1 1** 柯崇榕 吴毕莎 邵庆伟 杨威 黄建忠 1 (福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心,生命科学学院 福州 350108) 2 (莆田学院环境与生命科学系 莆田 351100) PDC 1 Kan Kanr Ampr pSH-PDC 1 LiAc/SS Carrier DNA/ 摘 要 扩增 全长和 基因,构建带有 和 的整合表达载体 ,线性化后 PEG法高效转化酿酒酵母YS2-△adh2-△ald6. G418结合PCR筛选获得阳性转化子,然后转入pSH65质粒,半乳糖诱导表 Cre Kan PDC 1 . PCR PDC 1 mRNA 达 酶切除 基因,获得 过表达菌株 荧光定量 分析表明过表达菌株 的 表达量是出发菌株的 2.078倍,遗传性能稳定,生长情况与出发菌株无明显差异. 发酵试验显示过表达菌株蔗糖消耗速率较出发菌株缓慢, 72 h 12.03% 5.62%. Cre-LoxP PDC 1 乙醇最大积累量为 的 ,提高了 利用同源重组原理和 系统,成功构建 基因过表达突变株 并提高了乙醇产量. 图6 表3 参 17 PDC 1 PCR 关键词 酿酒酵母; ;基因过表达;荧光定量 ;乙醇发酵 CLC TQ920.1 : Q786 Construction of Saccharomyces cescerevisiae Mutant with Overexpression of PDC1 Gene* 1 2 1 1 1** KE Chongrong , WU Bisha , SHAO Qingwei , YANG Wei HUANG Jianzhong 1 ( Engineering

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