黑曲霉固体发酵产木聚糖酶的响应面优化设计及其酶学性质的研究.pdfVIP

农业 生物技术学 报 ,2010 年, 第18 卷, 第1 期, 第52 -60 页 JournalofAgriculturalBiotechnology,2010,Vol.18,No.1,52 -60 研究报告 ALetter 黑曲霉固体发酵产木聚糖酶的响应面优化设计及其酶学性质的研究 * 刘明启 关荣发 陈文 伟 中国 计量学 院生 命科学 学院 食品系, 杭州,310018 * 通 讯作者,tony_cjlu@ 摘要 本研究采用响应面法的中心组合对影响黑曲霉 JL15 固 体 发 酵 产 木 聚 糖 酶的条件进 A s p e rg il lu s nig e r 行了优化。以橘皮粉为基质 , 补充碳源、 氮源, 以及含水量和发酵时间对木聚糖酶产量具有显著影响 P 0.05 。 模拟 二次多 项式回归 预测模型 , 并建立自 变量与 响应值的 回归方程 , 获得各因 素的昀 佳水平, 即: 甘油、 硫酸 铵的添加量分别 为 4.2% 和 3.1% , 含水量为 61% , 发酵时间为 73.4h , 木 聚 糖 酶活 性昀 大预 测值 达 922.9 U/g 干发 酵产 物 , 验证 值为 917.7 U/g 干发 酵产 物, 高出 基础 培养 基酶 活 3.2 倍。 酶学 性质 分析 研究 表 明 , 黑曲 霉 木 聚糖酶XylA 的昀适 温度和昀适 pH 分别为 55℃和 pH5.0 。XylA 的 和 值分 别为 9.24 mg/mL m max 2+ 2+ 2+ 3+ 2+ 和54.05 滋mol/min/mL 。Mn 、Zn 和 Mg 对XylA 活性 具有促 进作用 , 而Fe 和Cu 对XylA 活性 具有明 显 抑制作 用 。HPLC 分析 结果表 明 ,XylA 的 水解桦 木木聚 糖和麸 皮不溶 性木聚 糖的产 物均 为木糖 至木六 糖 , 主 要产物 为木 三糖 。 关键词 木 聚糖酶, 响应面 法, 优化, 水解, 木三 糖 Optimization of Solid State Fermentation Conditions for Xylanase Produc- tion by Using Response Surface Methodologyand the En- A s p e rg illus nig e r zymaticProperties * LiuMingqi GuangRongfa ChenWenwei DepartmentofFoodScience,CollegeofLifeScience,ChinaJiLiangUniversity,Hangzhou,310018 *Correspondingauthor,tony_cjlu@ DOI:10.3969/j.issn.1674 -7968.2010.01.009 Ab s t ra ct TheproductionofxylanaseXylAbyanewlyisolated A s p e rg il lus nig e rJL15straininsolidstatefermen- tationSSFonorangepeelwasoptimizedbyresponsesurfacemethodologyRSM.Resultsrevealedthatfourfac- tors of concentrations of added glycerin and ammonium sulfate, moisture content, fermentation time had signifi- canteffectontheXylAproduction P 0.05.Themaximumxylanaseactivity917.7U/gdryfermentationproduct obtained at 4.2% glycerin, 3.1% NHSO byemployingorangepeelasthe solidsubstrate,61%moisture content 4 2 4 and73.4hfermentation,whichwasclosetothepredictedone922.9U/g,andwas3.2timeshigherthanthatofthe basic medium 218.5 U/g. The optimum temperature and pHfor XylAactivitywere 55 ℃ and pH5.0, respective- -1 -1 ly. XylA exhibited K and V values of 9.24 mg/mL and 54.05 mol ?min ?mL , res