“黑农35”和“黑生101”两种大豆品种胚尖再生体系的建立.pdfVIP

第40卷 第2期 上海师范大学学报(自然科学版) Vo1．40，No．2 2011年 4月 JournalofShanghaiNormalUniversity(NaturalSciences) Apr．，2011 “黑农 35’’和 “黑生 101两种大豆品种胚尖 再生体系的建立 张红梅 ，王 帆2，任永刚 ，李建粤 (1．上海师范大学 生命与环境科学学院，上海200234；2．第二军医大学流行病学教研室，上海200433) 摘 要：以高蛋白大豆品种 “黑农35”和 “黑生101”为供试品材料，采用在分化及伸长培养基 中分别添加0．2mg／L6一BA和0．2mg／LIBA浓度激素配比，建立了胚尖再生体系，并分别在 芽诱导、不定芽伸长和生根3个环节对两种大豆品种进行了比较．结果显示：“黑农 35”大豆芽 诱导率高于 “黑生101”大豆22．15％，两者在已出芽外植体上的平均出芽数比较接近；“黑农 35”大豆不定芽伸长速度大于 “黑生 101”大豆，同时 “黑农35”大豆大于1cm的芽个数也多于 “黑生 101”大豆；“黑生 101”大豆生根率 以及根系生长状态好于 “黑农 35”大豆．本研究为今 后 以“黑农35”和 “黑生 101”大豆为材料进行遗传转化研究奠定了基础． 关键词：大豆；“黑农35”；“黑生101”；胚尖；再生体系 中图分类号：$565．1 文献标识码 ：A 文章编号：1000-5137(2011)02-0186-05 O 引 言 “黑农35”大豆是一种高蛋白高产品种，蛋白质含量为45．24％，还能够抗旱、抗涝、耐病毒等 ； “黑生 101”大豆蛋白质含量为45．44％，最高可达46％，其中经济价值很高的可溶性球蛋白所 占比例高 达72．9％，是一种优质、高产、稳产、适应性强的大豆品种 ．这两种大豆都是大豆生产中的重要品种． 以生产中使用的大豆品种为受体成功进行遗传转化，将更有利于转基因大豆在今后生产中被推广应用． 刘海坤等[332004年首次报道了以大豆成熟种子的胚尖作为遗传转化的外植体．胚尖再生体系与 目 前大豆遗传转化最常用的子叶节再生体系比较，具有再生率高、重复性好的优点 ．李文霞等 从 11 个大豆品种中筛选出对农杆菌易感性最强的大豆品种为 “黑农 35”．肖刚等 采用子叶节法建立 “黑生 101”大豆再生体系研究中发现，“黑生 101”大豆分化芽的生根率高达 100％，而且根系健壮、发达．有效 地生根也是大豆再生过程中非常重要的环节．有报道显示根系不健壮是造成大豆再生效率低的主要原 因之一 ． 自刘海坤等以胚尖作为大豆遗传转化的外植体报道后，尽管陆续又有以大豆胚尖转化成功的报道， 如党蔚 ]、孙文丽等 ]，也有学者以胚尖为外植体进行再生研究 ’加J．但在这些报道中都没有以 “黑农 35”和 “黑生 101”两种大豆作为受体材料．不同基因型大豆再生过程中产生丛生芽数 目、出芽率、植株再 生率在相同激素浓度和不同激素浓度诱导下均存在差异 ．组培再生系统的建立是大豆遗传转化成功 的前提．为了今后能够以这两种大豆胚尖为外植体进行遗传转化研究，本试验参照刘海坤等报道中使用 收稿 日期：2010-08．30 基金项目：上海市教育委员会重点学科建设项 目资助(J50401) 作者简介：张红梅(1979一)，女，上海师范大学生命与环境科学学院硕士研究生；李建粤(1958一)，女，上海师范大 学生命与环境科学学院副教授． 通信作者 第2期 张红梅，王 帆，任永刚，等：“黑农35”和 “黑生 101”两种大豆品种胚尖再生体系的建立 187 的6一BA和 IBA激素浓度配比，建立了 “黑农35”和 “黑生 101”两种大豆成熟种子胚尖再生体系． 1 材料和方法 1．1 大豆材料 本试验所用的材料为 “黑农35”大豆和 “黑生 101”大豆．两种大豆品种分别由黑龙江省农科院满为 群研究员和刘昭军研究员提供． 1．2 培养基 大豆胚尖再生系统中使用的培养基种类及组成见表 1． 表 1 大豆胚尖再生培养基 培养基