PCR方法诊断猪瘟病毒和猪丹毒杆菌混合感染.pdfVIP

球}}}}}}*÷}}} 兽医临床 躲 CR方法诊断猪瘟病毒和猪丹毒杆菌混合感染 王彦红，刘文博 ，邵慧君 ，张彬彬，朱 杰，周明荣 (扬州大学兽医学院，江苏扬州 225009) 摘 要：应用PCR快速检测急性病死猪的病原。采集病死猪脾等组织，用PCR方法检测猪繁殖与呼吸综 合征病毒 (PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪圆环病毒2型(PCV一2)。同时采集病死猪肝、心血，无菌接种血平板 进行细菌分离，用 16SrRNA基因测序法鉴定分离茵。对分离菌株进行药敏试验。PCR检测结果显示检测样 品用CSFV引物扩增 出475bp的条带，用PCV-2和 PRRSV引物未扩增 出条带。细菌分离结果显示，在血平板 出现针尖大小的菌落，16SrRNA基 因测序法鉴定分离茵为猪丹毒杆菌。药敏试验结果显示，分离菌对强力霉 素和环丙沙星等药物敏感。应用PCR方法对病死猪的病原快速鉴定，结果表明病死猪为猪瘟病毒和猪丹毒杆 茵混合感染。 关键词 ：猪瘟病毒 ；猪丹毒杆菌；混合感染；诊断 中图分类号：$852．651；$852．613 文献标识码 ：B ． 文章编号：1007—5038(2011)09—0113—04 有许多传染性疫病可引起猪急性死亡，例如猪 郁血 ，胆囊萎缩 ，肾皮质有较多出血点，膀胱点状出 繁殖与呼吸综合征 、猪瘟、猪丹毒 、猪肺疫和猪链球 血 ，肠系膜淋巴结肿大并周边 出血 ，胃底大面积出 菌病等，这些疾病也是我国近年来猪高热病 的主要 血 ，盲肠出血。为了能对送检病死猪及时诊断 ，采用 病原，以单独感染或混合感染的形式 出现，给养猪业 已建立的PCR方法检测临床上常见 的猪病毒性疫 造成了巨大经济损失[1]。猪瘟是 由黄病毒科瘟病 病，同时采集心血和肝组织进行细菌分离，对分离菌 毒属的猪瘟病毒 (Classicalswinefevervirus，CS— 用 16SRNA鉴定方法鉴定，结果显示送检猪为猪 FV)引起的高度接触性传染病，感染猪表现为急性、 瘟病毒和猪丹毒杆菌混合感染 。 亚急性、慢性等多种临床症状 ，是世界动物卫生组织 1 材料与方法 (0IE)规定的必须报告 的传染病 ，也是我 国农业部 1．1 材料 规定的一类传染病 。目前，猪瘟在亚洲呈地方性流 RNA试剂盒为上海生工生物工程技术服务有 行 ，在许多南美洲国家和东欧国家呈大流行[3]。 限公司产品。DNA提取试剂盒 、总 RNA反转录试 猪丹毒是 由猪丹毒杆菌 引起 的一种急性传染 剂盒 、TaqTMDNA聚合酶、16SrDNABacterialI— 病 ，临床表现为急性败血型或亚急性的疹块型、慢型 dentificationPCRKit和 200bpDNA Marker为宝 的关节炎或心内膜炎，急性败血型主要以突然死亡 ， 生物工程 (大连)有 限公司产品；AgaroseGelDNA 皮肤 、黏膜 、浆膜出血或淤血。猪丹毒杆菌在世界范 ExtractionKit为 Roche公司产 品；药敏纸片，为杭 围内广泛存在，可以感染脊椎动物和无脊椎动物 ，包 州天和微生物试剂 有 限公 司产 品。PTC一200型 括家畜、禽类及人L4]。 PCR仪为美国MJ公司产品；BIO-RAD3000XI型 扬州某养殖场新 引进母猪 2O头和育肥猪 8O