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第34卷第5期 渔业科学进展 V01．34，No．5
2 01 3年10月 PR()GRESSINFISHERYSCIENCES Oct．，2013
三疣梭子蟹C一型凝集素的原核表达和活性检测
于金红 潘鲁青。
(中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室，青岛266003)
lectinlike—domain
摘 要 通过RT—PCR扩增三疣梭子蟹C一型凝集素(C—type protein，CTLD)基
blot
检测。用His Ni亲和层析柱及超滤离心管纯化目的蛋白，并对其进行活性检验。结果表
GraviTrap
明，构建得到CTI。D基因的原核表达载体，双酶切鉴定得到与预期片段相符的外源基因插入片段，经
600的目的蛋白，经SDS～PAGE和
测序与目的序列完全一致；诱导表达出相对分子质量(M)39
Western
blot检测，融合蛋白成功表达；重组C一型凝集素对兔的红细胞没有明显的凝集作用，但对小
鼠红细胞的凝集效价是22，而对所选5种细菌的凝集作用存在差异，其中对大肠杆茵具有明显的凝
集作用，而对溶藻弧菌、哈维氏弧茵、鳗弧菌和金黄色葡萄球菌均无凝集现象。本研究结果为进一步
研究C一型凝集素在免疫防御中的作用与地位提供依据。
关键词 三疣梭子蟹 C一型凝集素 原核表达 活性检测
中图分类号$96 文献识别码 A 文章编号 1000～7075(2013)05—0058—06
of lectinlike’-domain
ProkaryoticexpressionCI-type proteingene
and ofrecombinant
ofPortunusfrif比易rcMZnf配s protein
activityanalysis
YU PAN
Jin—hong I。u—qing”
of 266003)
of ofEducation，Ocean
Mariculture，Ministry UniversityChina，Qingdao
(KeyLaboratory
ThetotalRNAextractedfromthe ofPortunus
ABSTRACT hemocytesample
usedto theDNA an framefor lectinlike——do——
was openreading C——type
amplify sequenceencoding
into 8一Tvector
main
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