盐酸蒽诺沙星与牛血清白蛋白相互作用研究.pdfVIP

第23卷 第 12期 乐…师范学院学报 Vo1．23。No．12 2008年 12月 Journ~ ofLeshanTeachersCollege Dec．2008 盐酸蒽诺沙星与牛血清白蛋白相互作用研究 王小雪 李晓燕 宋九华 谢 林 (乐山师范学院 化学与生命科学学院，四川 乐山 614004) 摘 要：用荧光光谱法研究了盐酸葸诺沙星与牛血清 白蛋白的结合反应 ，测定了该反应的结合常数 ，结合点位数及热 力学参数。并确定了分子问的作用力性质；根据非辐射能量转换机制，确定了盐酸蒽诺沙星一牛血清白蛋白问的结合距离。 采用同步荧光技术考察了盐酸蒽诺沙星对牛血清 白蛋白构象的影响。 关键词：盐酸蒽诺沙星，牛血清白蛋白，荧光光谱 中图分类号：0657．3R969．2 文献标识码：A 文章编号：1009—8666(2008)12—0042—03 0 引言 J )。 1．2 试剂 盐酸蒽诺沙星为兽医专用的第三代氟哇诺酮类，有广 盐酸蒽诺沙星(ENLX，纯品原料药，由四川乐山长征 谱杀菌作用，对革兰氏阳性菌与阴性菌都有 良好的抗菌作 制药厂提供)工作液：2．5x10mo~L；牛血清 白蛋白(BSA，上 用。研究其与蛋白质的作用，有助于帮助人们了解药物在 海伯奥生物科技有限公司)溶液：5．2xl04mol／L；NaC1溶液： 动物体内的存储和转运过程，同时能为药物的设计与开发 0．5mol／L；pH7．40的三羟甲基氨基甲烷一盐酸 (Tfis—HC1)缓 及药理研究提供有价值的信息。因此，研究盐酸蒽诺沙星 冲溶液。 与蛋白质的作用具有十分重要的意义。 除盐酸蒽诺沙星、牛血清 白蛋白外，其余试剂均为分 荧光光谱是研究生物大分子与有机小分子相互作用 析纯，实验用水为二次去离子水，经检验无荧光杂质。 的重要手段之一…。本文用荧光、紫外光谱法研究在模拟生 1．3 实验方法 理介质条件下盐酸蒽诺沙星 (ENLX)与牛血清白蛋白 在 10mL比色管中依次加入 0．5mol／L的NaC1溶液 (BSA)之间的相互作用，报道了盐酸蒽诺沙星与 BSA间的 2．0mL、BSA溶液2．0mL及一定量的ENLX工作液，以Tns— 结合常数、结合位点数、作用距离、热力学参数等重要的相 HCI缓冲溶液定容为 10．0mL，在一定的温度条件下恒温 互作用信息及盐酸葸诺沙星对BSA构象的影响，试图从分 20rain，用 RF一5301荧光光谱仪在激发和发射光谱的狭缝 子水平了解蛋白质分子与盐酸蒽诺沙星相互作用机制 ，为 宽度分别为3nm下，扫描一定温度下BSA及BSA在盐酸 兽药的设计与开发提供重要的信息。 蒽星作用下的荧光光谱 、同步荧光光谱 ；用 uv一530型紫 外一可见分光光度计测定盐酸蒽诺沙星的紫外吸收光谱。 1 实验部分 1．1 仪器 2 结果与讨论 RF一5301PC型荧光分光光度计 (日本岛津公司)； 2．1 盐酸蒽诺沙星对BSA的荧光猝灭光谱 PItS一3C型精密 pH计 (上海雷磁仪器厂)；UV-530型紫 图1是ENLX、ENLX与BSA混合后体系的荧光光谱 外一可见分光光度计 (日本JASCO公司)；FC一204电子分析 图。当激发波长为280nm时，蛋白质表现的是色氨酸和酪 天平 (上海天平仪器厂)；501型超级恒器 (上海实验仪器 氨酸残基的荧光。而激发波长为 295nm时，仅仅表现色氨 收稿 日期 ：2007—09—24