饲用纤维素酶测定方法的探讨.pdfVIP

王义甫，等：饲用纤维素酶测定方法的探讨 一 35一 饲用纤维泰磕测定方法的探讨 王义甫 何艳玲 孔令娜 (1．中国科学院沈阳应用生态研究所，沈阳 110016；2．辽宁星河生物有限公司，沈阳 110168) 摘 要 ：本文在总结纤维素酶作用机理的基础上，根据饲料 中所含不溶性纤维素的特性 及其降解时对酶系要求，推荐 以滤纸为底物测定饲用纤维素酶活力。 关键词：饲用；纤维素酶；测定法 TheDeterminationMethodDiscussionofFeedCellulase WangYipu HeYanling KongLingna Abstract：A methodformeasuringcellulaseactivitiesassubstrateusingfilterpaperhasbeen recommendedinthearticleaccordingtopropertiesofcontaininginsolublecellulose in thefeed andrequiringenzymesystem foritsdegradationbasedonthemechanism ofcellulaseaction． KeyW ords：feed；cellulase；measuringmethod 饲用纤维素酶测定条件应 以动物 胃肠 pH 纤维素，而作用于结晶纤维素，主要产物是纤维 条件与消化温度为依据，这一点已获得大家的共 二糖 (Wood等，1975；中国科学院微生物研究所 识，但用何种纤维素为底物测定饲用纤维素酶没 纤维素 酶组 ，1976；Mishra，1988；sfisodsuk等 ， 有获得统一认识 ，大部分主张用可溶性羧 甲基纤 1998)，对它的作用位点还有争议 ；C 酶亦称 B 维素 (CMC)为底物测定饲用纤维素酶，少数采 一 1，4葡聚糖酶，易作用于羧 甲基纤维素 ，它分 用不溶性纤维素(滤纸)为底物测定饲用纤维素 内切 B一1，4葡聚糖酶与外切 p一1，4葡聚糖 酶。本文在总结纤维素酶作用机理的基础上根 酶，前者作用于较长的纤维素链 ，主要产物是纤 据饲料中所含不溶性纤维素的特性及其降解时 维糊精、纤维二糖、纤维三糖 ，后者作用于纤维素 对酶系要求，探讨以滤纸为底物测定饲用纤维素 链的非还原端，挨个依次切下葡萄糖，产物是葡 酶的理论依据、实用性与可行性。 萄糖；B一葡萄糖苷酶是水解纤维二糖和寡糖为 1 根据纤维素酶作用机理与应用对象选择纤维 葡萄糖。 素酶测定方法 Reese等(1950)提出了纤维素酶协 同作用 纤维素酶是降解纤维素生成葡萄糖一类酶 的理论，认为 C 酶是水解因子 (氢键酶)，先作 的总称。主要由C。酶、C 酶与B一葡萄糖苷酶 用纤维素结晶区，使氢键破裂，呈无定形可溶态， 组成 。 由C 酶催化成纤维二糖，再由B一葡萄糖苷酶 C，酶亦称 B一1，4葡聚糖纤维二糖水解酶， 水解成葡萄糖。在很长一段时间里，这假说被普 是纤维素酶系的重要组分，它不易作用于羧甲基 遍接受。随着酶分离技术的提高，Wood(1972) 一 36一 中国饲料添加剂 2008年第 1期 (总第67期) 从康氏木酶，Pettersson(1972)从绿色木酶纯化 物细胞壁，提高有效养分提取率。植物细胞壁， 到C 酶，发现 C 酶本身并不能作用纤