彝药青羊参离体培养庆大霉素抗性筛选.pdfVIP

江苏农业科学 2008年第6期 一 81一 彝药青羊参离体培养庆大霉素抗性筛选 邱 璐 ，杨海艳 ，胡明建，范树国，邹银燕，郑才智，吕加燕，杨启国 (楚雄师范学院化学与生命科学系，云南楚雄 675000) 摘要：以青羊参离体培养的茎、叶及愈伤组织为材料，以不同浓度的庆大霉素为筛选压，就青羊参离体茎、叶及愈伤组织对庆大霉 素的抗性水平进行浓度筛选。结果表明：庆大霉素对青羊参离体茎、叶的致死浓度为50mg／L，对愈伤组织的致死浓度为75mg／L。青 羊参对庆大霉素极为敏感，用庆大霉素抗性基因作为标记基因，筛选转基因青羊参植株有较好效果。 关键词：青羊参；离体培养；庆大霉素；抗性；筛选 中图分类号：R286．1 文献标志码 ：A 文章编号：1002—1302(2008)06—0081—02 彝药是彝族人民长期用于防治疾病的药物，在彝族地区 用于生产青羊参片剂与健脑克癫片，用于临床治疗癫痫病、脑 有悠久的药用历史，往往以口碑、图形等方式世代传承…。 震荡后遗症、美尼尔氏综合症等 。通过转基因技术提高 青羊参 (CynanchiotophylliSuhneid．)为萝摩科多年生缠绕草 青羊参的抗虫抗病性及有效成分青羊参总苷的含量，是今后 本植物，是一种重要的彝药，其彝药名为尼迟色…，在 《滇南 青羊参研究的发展方向。本研究通过青羊参离体培养 庆 本草》中又名白蔹，在云南丽江又名白首乌，民间又称之为白 大霉素抗性筛选，为今后开展青羊参 遗传转化研究中的标 岑、奶浆草，分布于云南、四川、广西、贵州 、西藏等地，多生长 记基因确立及转基因植株的抗性筛选提供技术支撑。 在海拔 1100—2500m的亚热带山地草丛中。青羊参以根部 1 材料与方法 入药，但有毒性，民间用于滋补强壮，治疗腰痛 、风湿骨痛、小 儿惊风症、头晕、耳鸣、心慌、毒蛇咬伤等。根中主要含青羊参 1．1 材料来源 苷甲和青羊参苷乙，临床上具有较好的抗惊厥作用，对抗癫痫 青羊参供试材料来 自楚雄星开药业有限公司，并由刘爱 和迁延性肝炎有较好疗效。目前，已从根部提取青羊参总苷 民副教授进行种质鉴定。 1．2 方法 收稿 日期：2008—03—21 1．2．1 青羊参茎、叶离体培养抗庆大霉素浓度筛选 以愈伤 基金项 目：云南省 自然科学基金(编号：2006COO86M)；云南省学术技 组织诱导培养基 (MS+2，4一D1．5mg／L+6一BA1．5mg／L) 术带头人后备人才基金 (编号：2006PY01—61)；楚雄州学术技术 为基本培养基 ，分别加入庆大霉素O、25、50、75、100mg／L， 带头人基金 (编号：200401)；楚雄师范学院院级重点建设学科基 进行青羊参离体茎、叶抗庆大霉素的浓度筛选。培养温度25 金 (编号：05YJJSXK03)。 ℃，接种后暗处理 15d_5。 作者简介：邱 璐 (1965一)，女，重庆人，硕士，副教授，主要从事植 1．2．2 青羊参愈伤组织抗庆大霉素浓度筛选 以诱导芽形 物组织培养及转基因研究。Tel：(0878)3100507；E—mail：qiulu5 @ rip．sina．como 成的培养基 (MS+KT0．5mg／L+NAA0．1mg／L)为基本培 通讯作者：范树国，博士，教授。主要从事生物化学及分子生物学研究