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中国科技论文在线
利用嵌合内含子增强 HIV-1 Vif 蛋白的体外
表达#
1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2**
罗海华 ，黄凤 ，张雪 ，张旭 ，张辉 ，刘超
5 （1. 中山大学人类病毒学研究所，广州 510080；
2. 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室，广州 510080 ）
摘要：目的：为了增强HIV-1 Vif 蛋白的体外表达，构建含有嵌合内含子的真核表达载体。
方法：利用基因重组的技术，成功克隆出在载体自带启动子和vif 开放读码框之间带有嵌合
内含子的重组质粒pcDNA3.1-intron-vif-HA ，以不含嵌合内含子的质粒pcDNA3.1-vif-HA 作
10 为对照，通过蛋白印迹杂交显示两种重组质粒中Vif 蛋白的表达差异；此外，利用Vif 蛋白
可降解宿主蛋白APOBEC3G 的能力通过共转染实验验证该重组质粒表达的Vif 蛋白具有正
常的功能活性。结果：含有嵌合内含子的重组质粒的Vif 表达量明显高于不带嵌合内含子的
质粒；而且，加入含嵌合内含子的重组质粒后，与之共表达的APOBEC3G 蛋白量明显下降。
结论：在载体自带启动子和vif 的开放读码框之间加上嵌合内含子，可显著提高HIV-1 Vif
15 蛋白的体外表达水平，并且该蛋白具有正常的功能活性。
关键词：嵌合内含子；Vif；APOBEC3G ；体外表达
中图分类号：Q78
Utilize chimeric intron to improve the expression of HIV-1
20 Vif in vitro
LUO Haihua1,2, HUANG Feng1,2, ZHANG Xue1,2, ZHANG Xu1,2, ZHANG Hui1,2,
LIU Chao1,2
(1. Institute of Human Virology, Sun Yat-sen University, GuangZhou 510080;
2. Key Laboratory of Tropical Disease Control of Ministry of Education, Sun Yat-sen University,
25 GuangZhou 510080)
Abstract: OBJECTIVE Construct eukaryotic expression plasmids of HIV-1 vif gene with
chimeric intron to improve the expression of HIV-1 Vif in vitro for better study of its biological
function. METHODS Adding an intron between the promoter of the vector and open reading
frame (ORF) of vif to ge
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