大口黑鲈肌肉生长抑制素前肽真核表达载体的构建及其在肌肉组织中的表达.pdfVIP

大口黑鲈肌肉生长抑制素前肽真核表达载体的构建及其在肌肉组织中的表达.pdf

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第 29 卷 第 1 期 广东海洋大学学报 Vol.29 No.1 2009 年 2 月 Journal of Guangdong Ocean University Feb. 2009 大口黑鲈肌肉生长抑制素前肽真核表达载体的 构建及其在肌肉组织中的表达 1,2 2 2 张宁宁 ,白俊杰 ,何小平 , 2 2 2 1 郭玉函 ,叶 星 ,李胜杰 ,杜晓东 (1.广东海洋大学水产学院 广东湛江 524088; 2.中国水产科学研究院珠江水产研究所 中国水产科学研究院热带亚热带鱼类选育与养 殖重点开放实验室 广东广州 510380) 摘 要:将大口黑鲈(Micropterus salmoide )肌肉生长抑制素(Myostatin ,MSTN )前肽(MSTN-Pro)的 cDNA 定向 克隆到真核表达载体 pcDNA3.1(-)/mycHisB 中,双酶切检测和测序鉴定证实,插入 pcDNA3.1(-)/mycHisB 载体中的 片段为目的基因的核苷酸序列,MSTN 基因前肽 cDNA 为正向插入,且重组质粒无错配或插入移位等突变。采用肌 肉注射法将重组表达质粒注入大口黑鲈背部肌肉组织,在注射后第 2 天经 RT-PCR 检测到 MSTN 前肽基因 mRNA 的表达,第 6 天经免疫组化学检测到 MSTN 前肽蛋白的表达,第 8 天蛋白表达强度增强,对照组始终未检测到 MSTN 前肽基因的表达。 关键词:大口黑鲈;肌肉生长抑制素(MSTN );真核表达;表达载体;肌肉注射;免疫组织化学 中图分类号:Q78 + Q959.483 文献标志码:A 文章编号:1673-9159(2009)01-0016-05 Construction of Eukaryotic Expression Vectors of Myostatin Propeptide Large-Mouth Bass (Micropterus salmoides )and Its Expression in Dorsal Muscle 1,2 2 2 ZHANG Ning-ning , BAI Jun-jie , HE Xiao-ping , 2 2 2 1 GUO Yu-han , LI Sheng-jie , YE Xing , DU Xiao-dong (1. Fishery College of Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China; 2. Pearl River Fisheries Research Institute, Key Laboratory of Tropical Subtropical Fish Breeding Cultivation, CAFS, Guangzhou 510380, China) Abstrac

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