七带石斑鱼类胰岛素生长因子-Ⅰ成熟肽的克隆及原核表达与活性分析.pdfVIP

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 七带石斑鱼类胰岛素生长因子 成熟肽的 克隆及原核表达与活性分析 陈圣毅 刘新富 徐永江 刘芝亮 柳学周 史 宝 王妍妍 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业可持续发展重点实验室山东 青岛 上海海洋大学水产与生命学院上海 中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛市海水鱼类种子工程与生物技术重点实验室山东 青岛 摘要 应用方法扩增七带石斑鱼类胰岛素生长因子 成熟肽序列 该成熟肽 序列由 个碱基组成编码 个氨基酸包括 个结构域 将此成熟肽片段导入原 核表达载体上在诱导下成功在 中融合表达 分 析表明融合蛋白大小为 在诱导后 表达量最高 占菌体总蛋白的 重组蛋 白主要以包涵体形式存在 对重组蛋白进行变性 纯化和复性获得了纯化的重组蛋 白 免疫印迹分析表明融合蛋白可特异性地被 抗体识别 细胞增殖实验表 明纯化的融合蛋白能促使人乳腺癌细胞 细胞增殖表明具有生物活性 关键词 七带石斑鱼 类胰岛素生长因子 成熟肽克隆 原核表达 生物活性分析 中图分类号 文献标志码 类胰岛素生长因子 罗 非 鱼 是胰岛素生长因子家族中的一员广泛存 金鱼 团头鲂 在于脊椎动物体内 生长激素类胰岛素生长因子 和斑 马鱼 轴是鱼类生长和生殖的重要内分泌调 等研究发现在鱼类中具有高度的同源 控系统 而 是 轴 的关键 因 性在进化上是高度保守的 子 鱼类的是由 个氨基酸残基组成 七带石斑鱼 属 的碱性单链多肽其中肝脏是其主要合成和表达的 鲈形目 科 石斑鱼属 场所 的前肽是由信号肽和 主要分布于韩国 日本沿海和中国 个结构域组成 成熟肽蛋白只保留 的黄海东海沿岸为石斑鱼属中唯一在黄海分布 个结构域切除了信号肽和 区 在鱼类生 的品种 因其能够