一株植物乳杆菌培养条件优化.pdfVIP

第3期 总第 189期 农业科技与装备 NO．3TotalNO．189 2010年3月 AgriculturM ScienceTechnology and Equipment M ar．2010 一 株植物乳杆菌培养条件优化 柴虹宇，王玉田 ，张莉力 (辽宁医学院 食品科学与工程学院，辽宁锦211121001) 摘要：采用单因素试验的方法，优化突变株LplantarumP1881的培养条件。优化后的培养条件为：培养时间48h；发酵液初始pH 值6．5；接种量 (V／V)4％；培养温度 30℃，此时苯乳酸产量为0．624g／L。 关键词：植物乳杆菌：培养条件：苯乳酸 中图分类号：R155．5 文献标识码：A 文章编号：1674—1161(2010)03—0028—03 苯乳酸为一种新型生物防腐剂，能抑制多种食源 1．1．3主要试剂 苯乳酸购 自ALFA公司；其他材料 性致病菌、腐败菌，且具有宽广的pH范围、热稳定性 为市售，甲醇为色谱纯，试剂为分析纯。 等优点，已引起了人们的关注，但受发酵水平低、产量 1．1．4主要仪器与设备 日立高效液相色谱系统 ：配 不高等因素的制约，难以进行工业化生产_1]。 有 日立L一7420紫外检测器和Kromasil—C18反向色 辽宁医学院食品科学与工程学院实验室于2008 谱柱(250mnix4．6lnm，5 m)。 年分离获得一株产苯乳酸的乳酸菌，并鉴定为植物乳 1_2 试验方法 杆菌，后经过诱变育种 ．得到一株高产突变株 L．plan． 1．2．1 苯乳酸含量的测定 1)发酵液处理：将经过筛 tarumP1881。菌株的发酵水平不仅与其遗传性能和生 选获得的菌株接种于液体发酵培养基．30qC培养48 理特性有关，还与其培养条件有关。因此，有必要对遗 h；取 10mL发酵液，加20mL乙醇，5000r／min离心 传性能稳定的高产苯乳酸突变株L．plantarumP1881 15min；取上清液，95oC水浴保温40min，用 10mL 的培养条件进行优化改 良，以期提高其产量，从而为 乙醚萃取 2次，合并萃取液，50℃挥干，用甲醇溶解 工业化生产苯乳酸提供可行依据。 并定容至 10mL，冰箱冷藏备用。2)苯乳酸的测定[2] 1 材料与方法 (HP[C法)：流动相为 甲醇和水的混合液；梯度洗脱 1．1 材料与仪器 程序为0～15min由70％甲醇线性变化至 100％．15～ 1．1．1 试验菌株 L．plantarumP1881由微生物实验室 20min保持 100％甲醇．20～22min由100％甲醇线性 保藏。 变化至 70％；检测波长为 210nm；流速为 1mL／min； 1．1．2 培养基 种子培养基组成为：葡萄糖 10g／L。 柱温为 30oC；进样量为 10 L。 酵母粉 10g／L，蛋 白胨 10g／L，番茄汁300mL／L， 1．2．2 pH值的测定 采用PHS一3C精密 pH计测定 pH6．2-6．4。 pH值。 发酵培养基组成为：葡萄糖25g／L，酵母浸粉 35 1．2．3 茵体生长量的测定 菌体生长量的测定采用 g／I，磷酸氢二钾2．2g／I，MgSO41g／L，MnSO40．3g／1，吐 比色法 ：发酵液用无菌水稀释至 l0倍体积，以培养 温一803mL／L，pH6．2～6．4。 基为空 白对照，测定 0D锄处的吸光度。 1．2．4 残糖的测定 残糖的测定采用菲林滴定法[。 收稿 日期 ：2010一Ol一20