应用种公猪精子密度图片估算精子数方法的研究.pdfVIP

研 究 与综 述 应用种公猪精子密度图片估算精子数方法的研究 王佳辉 高圣明 唐玲玲 宋 岩 (黑龙江省畜牧研究所 161005) 随着近几年猪人工授精技术的不断完善和养殖 关上比色室的盖。按下 “MODE”键，“吸光度”发出 者对猪人工授精技术的认知程度明显增加，使得该 红光 ，此时处于测量吸光度状态，比色杆拉出 1格 ， 项技术迅速发展并普及。在人工授精技术当中，精液 读出仪器显示的数字。将读出的数值与对照表对比， 的采集、稀释和输精是最重要的3个步骤。在精液的 相对应的数值即为测定的精子密度 (亿 ／毫升)。见 采集和输精技术都 日趋完善的今天，做好精液的稀 表 1。 释工作，更好更快的把采集到的精液稀释到所需要 表 1光密度与精子密度对照 的倍数，就成了所要研究的方向。而在精液稀释的过 程当中，精子数 目的计算尤为关键，因为其涉及到确 定精液的稀释倍数，如果处理不好出现较大的偏差 就会影响最终的结果。利用已知的精子密度图片来 确定精子密度，是既简单又直观的方法。因此，提出 此项研究以缩短确定精子数的时间和减少该项技术 的成本投入，在生产实践中具有较大的现实意义。 影像采集。在数码相机上安装适配镜，将相机镜 1材料 头对准显微镜的目镜进行拍照，采集出清晰的图像 试验动物由黑龙江省畜牧研究所种猪场提供。 各 1张并保留。 加系大白猪、长白猪 ，美系杜洛克猪、大白猪、长白 连续采集 3星期，并把 3星期内记录的结果进 猪，法系大 白猪、长 白猪共 3个品种 7个品系的种公 行比较，选出适合的图像并做成图片。 猪各 1头。 3采集的密度图片 试验仪器有显微镜、721分光光度计、数码相机、 图1—5分别是大白猪精子密度为 1、2、3、4和5亿 ／ 适配镜、采精杯、电子天平、过滤纸、载玻片、盖玻片、 毫升时的密度图片 (放大 100倍观察)。 一 次性食品保鲜袋、温度计。 图1—5仅供广大猪人工授精界同仁参考，在稀 2操作过程 释猪精液的时候可用此图来对照所采集精液，估算 每头猪每星期采集精液2次，连续采集 1个月。 出精液密度，从而快速方便的确定稀释倍数，以方便 用 7％氯化钠溶液把精液分别稀释到 1、2、3、4、5 余下步骤的操作。 亿 ／毫升。 利用分光光度计测精子密度。打开仪器开关，预 蹦霸疆孺 黜H 目H__啊 热3O分钟后，将 “波长设置”旋钮旋至在 550纳米 ， 将 比色杆推到最里，打开 比色室的盖，将黑体放在 比 疆露 目l 色室中的第 1格。取 1支比色杯，加入3毫升配好的 耧豳 稀释液 (7％氯化钠溶液)作为空白对照，放人比色室 豳 的第2格，比色杯的透光面对着光路。按下 “MODE” 黼_ 键 ，使 “透射比”键发出红光，此时黑体在光路中，再 E一 按下 “0％ADJ”键，仪器显示 “O．000”。将比色杆拉出 】格 ，此时空白对照杯在光路下，按下 “调 100％ ADJ”键，仪器显示 “100．0”，完成调百。另取 1个比 色杯，加入 2．7毫升稀释液(7％氯化钠溶液)，