化痰散结方含药血清对MCF-7／ADR细胞内阿霉素浓度的影响.pdfVIP

． ． 80．． ClinicalJournalofChineseMedicine2010年 VOL．(2)NO．7 化 痰 散 结 方 含 药 血 清 对 MCF．7／ADR细 胞 内 阿 霉 素 浓 度 的 影 响 Effectiveofphlegm withreagentsto MCF一7／ADRtheconcentrationofintracellularadriamycin · 孙长岗 贺珊珊 刘瑞娟 (1．潍坊市中医院，山东 潍坊，261041； 2．潍坊医学院，山东 潍坊，261041) 中图分类号：11284．5 文献标识码：A 文章编号：1674-7860(2010)07-0080·02 【摘 要】 目的：探讨化痰散结方含药血清对MCF．7／ADR细胞内阿霉素浓度的影响。方法：荧光分光光 度法分别测定MCF．7、MCF．7／ADR及加入化痰散结方含药血清的MCF．7／ADR细胞内阿霉素浓度。结果：化 痰散结方含药血清能显着增加耐药细胞 内ADM 的浓度。结论：化痰散结方具有逆转人乳腺癌MCF．7／ADR多 药耐药性的作用，可能与增加MDR细胞 内化疗药物聚集量有关。 【关键词】化痰散结方；乳腺癌；多药耐药；阿霉素 肿瘤细胞对抗肿瘤药物产生耐药，是导致肿瘤化 腹主动脉采血，无菌分离血清，经56℃、30分钟灭活 学治疗失败的常见因素，也是困扰肿瘤治疗的关键性 处理，用 0．22 m微孔滤膜过滤除菌后分装，分装入 难题。化痰散结方是我院血液肿瘤科近年来研制的院 小瓶，置一20℃冰箱保存备用。 内制剂，由制半夏、制南星、陈皮、云苓、天花粉、 1．2．2细胞培养 浙贝母、黄芪七味中药按一定比例组成，临床观察对 设MCF．7／ADR细胞加化痰散结方含药血清组为 乳腺癌有确切疗效。本研究通过观察化痰散结方含药 实验组；MCF．7／ADR细胞为对照组；MCF．7细胞为 血清对 MCF．7／ADR细胞内阿霉素浓度的影响，探讨 敏感组。MCF．7与MCF．7／ADR细胞分别接种于 50ml 其对人乳腺癌耐药细胞系MCF一7／ADR的多药耐药逆 培养瓶，加入 RPMI1640培养基，置于 37℃、饱和湿 转作用。 度、含5％CO2的细胞培养箱中无菌培养并传代， 1 材料与方法 MCF一7／ADR细胞连续培养在含 lmg／mlADM 的上述 1．1主要试剂和设备 培养基 中，以维持细胞的耐药性。取MCF-7／ADR细 实验用阿霉素敏感的人乳腺癌细胞株MCF一7及 胞分装入新培养瓶，每瓶细胞数 2×105／ml，添加化 人乳腺癌细胞耐阿霉素株 MCF一7／ADR购 白山东省医 痰散结方含药血清，置于37~C、饱和湿度、含 5％CO2 学科学院基础所 ：盐酸阿霉素 10rag／支 (批号：080707 的CO 细胞培养箱中继续培养。三组各取对数生长期 浙江海正药业股份有限公司)；化痰散结方药：由潍坊 细胞，加入适量的0．25％胰蛋白酶液消化，PBS液洗 市中医院中药房提供。配制中药混悬液，浓度 200％ 涤 2次，离心，吸弃上清液，配制成 2×105／ml细胞 (即每毫升含生药 2克)，4~C冰箱保存备用；RPMI 悬液，用于实验。 1640培养基：美国Gibco公司；小牛血清 ：美国Gibco 1．2-3荧光分光光度法测定各组细胞内ADM药物浓 公司；850型荧光分光光度计，日本 Hitachi公司产品。 度 1．2方法 各组分别加入不同浓度的ADM (20、40、60mg／ 1．2．1动物含药血清制备 m1)，观察各组细胞 内ADM 药物浓度。按ADM本身 6月龄 Wista