骨髓基质细胞成骨的研究进展.pdfVIP

维普资讯 解剖学研究2OO4年第 鲞笙 型坠 2 !堑! ： · 综 述 · 骨髓基质细胞成骨的研究进展 姜玉峰 李思源 慕晓玲 (新疆石河子大学医学院组胚教研室，石河子 832002) 摘【要】骨髓基质细胞作为骨组织工程的种子细胞具有广阔前景。许多实验证实骨髓基质细胞具有问充质干细胞特 性，表现为较强的增殖能力和向多种问充质细胞分化的潜能。目前已建立了体外培养骨髓基质干细胞的方法，而且正在摸索 进一步纯化的方法和诱导分化的条件。本文就骨髓基质细胞的研究现状与前景作一综述。 关【键词】 骨髓基质细胞； 问充质干细胞；组织工程 种子细胞研究是骨组织工程学的重要内容。理想的骨 部分区域形成细胞团簇．呈成纤维样细胞外观，至 l2～24h 种子细胞应具备以下特点：①取材方便 ；②在体外应有较强 细胞汇合成层 ，无粘附性的细胞经换液或传代而去除，骨髓 的增殖能力；③能适应材料和受区环境 ；④能在受区完全替 基质细胞得以纯化而继续培养。后者是根据骨髓 中细胞成 代缺失细胞的功能。目前，作为骨组织工程的种子细胞有4 分的比重不同，单核细胞 比成熟细胞的密度小 ，采用离心分 种来源：骨、骨外膜、骨髓和骨外组织。比较而言，骨髓基质 离法提取单核细胞进行培养。即用新鲜无菌的骨髓提取物 干细胞 (bonemarrowstaoma]．stemcells，BMSC)来源不受限，取 加入抗凝培养液稀释，将其加入内置 比重为 1．077的淋巴细 材方便，对供体损伤小 ，易于分离培养，体外增殖能力强，大 胞分离液的离心管 中，以 1500～2000r／rain，离心 2O～3O 量传代培养后仍具有成骨能力。BMSC是多种细胞的前体细 min，采集交界处的单核细胞层，洗涤 2～3次后，加入培养液 胞 ，具有多向分化潜能，能够向成骨系细胞、成纤维系细胞、 制成细胞悬液接种培养。 网状细胞 、脂肪细胞和内皮细胞等分化 lJ。BMSC在适宜的 2 BMSC的诱导分化 培养条件下增殖分化为成骨细胞具有较高的碱性磷酸酶活 性 ，可分泌骨钙素，合成并分泌 I型胶原等I2j。 骨髓基质细胞具有多向分化潜能，可向成骨细胞、软骨 细胞、脂肪细胞、网状细胞和肌细胞等多方而转化。ALP活 1 BMSC的来源与获取 性、矿化的基质 、骨特异性蛋白(0(2)、Col-1等通常作为骨分 BMSC可来源于机体各部位骨髓，人的BMSC通常取 自 化的特异性指标。促进骨髓基质细胞分裂增殖并定向分化 髂骨 ，不 同来源的 BMSC的功能状态不～。此外，分离的 为确定性骨祖细胞 ，可通过使用物理 、化学和生物等多种手 BMSC功能状态还受到取材部位和机体年龄的影响。nilne 段，以生物因素的作用最为显著和直接。其中bFGF，骨形成 等L3J发现，椎骨来源 BMSC的ALP活性低于股骨来源的 蛋 白(bonemorphogenetieprotein，BMP)、转 化生 长 因子一B BMSC，而骨特异性蛋 白(OC)mRNA的水平较后者高。Daivs (transforminggrowthfactor-~，rrGF-~)、地塞米松(dexamethasone， 等Hj观察到 ，随年龄增长，BMSC的成骨活性呈下降趋势 ，认 Dex)是 目前研究较多的因子。 为这是由于骨祖组织的数 目减少和／或对生长因子的反应性 2．1 bFGF 降低而致。 bFGF最初是从牛脑垂体分离 出来的一种蛋 白质，后发 在体外培养骨髓基质细胞 ，可稳定地形成纤维样细胞组 现在人体组织中广泛存