电针法对AD大鼠空间记忆行为及其海马区α7nAChR的影响.pdfVIP

山东医药2010年第50卷第5l期 电针法对 AD大 鼠空间记忆行为及其 海马区 nAChR的影响 车 鹏 ，田建英 ’，张学岚 ，陈维伟 (宁夏医科大学基础学院，银川750004) 摘要：目的 进一步提高阿尔茨海默病 (AD)的治疗效果。方法 取健康雄性SD大鼠5O只，随机分为正常组 (10只)、模型组(1O只)和观察组(30只)；除正常组外，其余大鼠均腹腔注射D．半乳糖 60mg／(kg·d)制备AD模 型；制模成功后观察组予 “益智醒脑”电针法刺激。采用定位航行试验测定电针刺激2、4、6周结束时各组逃避潜伏 期 ；空问探索试验观察各组跨台次数及 目标象限游泳时间百分比；免疫组化法检测各组海马区神经元上 烟碱型 乙酰胆碱受体(a7nAChR)表达的变化。结果 观察组与模型组较对照组逃避潜伏期增长，跨台次数及 目标象限游 泳时间百分比均减少，CA3区aTnAChR阳性神经元减少、灰度值减低 (P均 0．01)，但观察组与模型组各指标比 较 P均0．01。结论 “益智醒脑”电针法可改善 AD模型大 鼠空间记忆能力，且呈时间依赖性；海马CA3区 a7nAChR是电针刺激改善记忆的作用靶点。 关键词 ：阿尔茨海默病 ；~x7烟碱型乙酰胆碱受体；电针治疗 中图分类号：R749．1 文献标志码：B 文章编号：1002-266X(2010)47-0025-02 阿尔茨海默病 (AD)是一种发生于中老年人的 航行试验。测试分别于电针刺激开始前、电针刺激 中枢神经系统退变性疾病，已证实 目前尚无有效治 2、4、6周结束的第2天开始，历时5d。测试第 1天 疗方法。早期病变主要与脑内胆碱能系统功能降低 大鼠自由游泳2min，第 1天第2次开始训练，随后 有关，以进行性记忆力减退和认知功能障碍为特征。 每天于固定时段进行，每个时段4次，分别将大鼠由 有研究表明，针灸可以提高中枢胆碱能系统功能。 四个不同的起始点，即各个象限边缘 1／2弧度处，头 2009年，我们观察电针疗法对 AD大鼠脑 内海马区 朝池壁按顺时针方向依次人水，用 自动录像系统记 神经元a7nAChR表达的影响，旨在提高AD的治疗 录其逃避潜伏期(从人水至找到平台的时间)，每天 效果。 4个象限各训练一次，且不使大鼠连续两次在相邻 1 材料与方法 象限入水，测试时间为90S。若大鼠在90S内爬上 1．1 模型制备及处理 经 Morris水迷宫定位航行 平台，则记录其实际逃避潜伏期；若大鼠90s内未 试验粗筛后的健康雄性 SD大鼠5O只，3—4月龄， 找到平台，则将其引导上平台停留30s，其逃避潜伏 体质量250±20g(宁夏医科大学实验动物 中心提 期记录为90S。逃避潜伏期长短代表大鼠学习记忆 供)，清洁级。随机分为正常组(10只)、模型组(10 能力强弱，取后3d逃避潜伏期均数为大鼠的学习 只)和观察组(3O只)；除正常组外，其余大鼠均腹腔 记忆成绩。②跨台次数及 目标象限游泳时间百分 注射 D一半乳糖 60mg／(kg ·d)(生理盐水配制，60 比：采用空问探索试验。检测大鼠学会寻找平台后， g／I，给药量0．1ml／100g)共6周。造模成功后 l4 保持对平台空间位置记忆的能力。电针刺激 6周 d，观察组参照华兴邦等制定的 《大鼠穴位图谱的研 后，撤去平台，从平台对侧象限池壁中点入水 ，记录 制》，使用直径0．25mm的针灸针分别刺人百会 、肾 大鼠90S内跨越原平台位置的次数及其在原平台 俞、双侧 内关及双侧足三里。电针治疗仪 (SDZ．II 所在象限的游泳时间，重复2次。③海马 CA3区 型)参数设置为：3HZ，疏密波，15rain，刺激强度(1 nAChR表达：采用免疫组化 sP法。6周后大鼠 — 2mA)以大鼠肢体出现轻微抖动为度，2次／d，共 取海马，常规脱水、透明、浸蜡、包蜡、切片、脱蜡，按 6周。 照sP试剂盒说明书进行显色