银杏叶提取物对6-OHDA致PC12细胞损伤的保护作用及机制.pdfVIP

徐州医学院学报 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU 2011，31(10) ·673· 银杏叶提取物对 6一OHDA致 PC12细胞损伤的保护作用及机制 王杰 ，程言博 ，牟杰 ，印晓星 (1．徐州医学院药学院，江苏 徐州 221002；2．徐州医学院附属医院神经内科 ，江苏 徐州 221002) 摘要：目的 探讨6一羟基多巴胺 (6一OHDA)对PC12细胞的损伤作用，观测银杏叶提取物 (Ginkgobilobaex— tract，GBE)对该损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法 采用细胞培养的方法，建立 PC12细胞的6一OHDA 损伤模型。MrITI’比色试验检测细胞活性，Hoechst33342荧光染色观察细胞形态变化，ELISA法检测胞质多巴胺 (DA)的含量，免疫印迹法检测caspase～3观察细胞凋亡。结果 40mg／LGBE对 100ixmol／L6一OHDA作用于 PC12细胞24h具有一定的保护作用 ，GBE可明显升高6一OHDA诱导的PC12细胞DA的含量 (与损伤组比较 ，P 0．05)，GBE可减少6一OHDA诱导的PC12细胞caspase一3过度表达。结论 GBE可减轻6一OHDA诱导的 PC12细胞损伤和凋亡，其作用可能与抑制caspase一3蛋白酶的激活有关。 关键词：银杏叶提取物 ；PC12细胞 ；6一羟基多巴胺 ；神经保护 中图分类号：R742．5；R285．5 文献标志码 ：A 文章编号：1000—2065(2011)10—0673—04 NeurOpr0tectjVeeffectsofGinkgobilobaextractagainst6一OHDA induced PC12celllinedamageanditsmechanism WANGJie ，CHENGYanbo ，MOUJie，YINXiaoxing (1．SchoolofPharmacy，XuzhouMedicalCollege，Xuzhou，Jiangsu221002，China； 2．DepartmentofNeurology，TheAffiliatedHospitalofXuzhouMedicalCollege，Xuzhou，Jiangsu221002) Abstract：Objective TostudytheneuroprotectiveeffectandrelatedmechanismsofGinkgobilobaextract(GBE) against6一hydroxydopanfine(6一OHDA)inducedapoptosisinpheochromoeytoma(PC12)cells．Methods PC12 cellsdamagemodelwasinducedwith100 um0l／L6一OHDA andwastreatedwithGBE．Thencellmorphologywasob— servedandevaluatedwithmembrane—permeableblueHoechst33342，survivalrateanduhracellulardopamine(DA) levelweredeterminedbyMTTassayandELISA assay．Theexpressionofcaspase一3wasobservedbyWesternblot．Re- suits 40m#LGBEplayedaprotectiveroleinthedamageofPC12cellsinducedby100p,mol／L6一OHDAfor24h． GBEsignificantlyincreased uhracellularDA releaseinducedby6一OHDA in PC12 cells fP 0．05 VS．6一OHDA group)，andattenuatedtheoverexpressionofeaspase一3inducedby6一OHDAinPC12cells．Concl