海产品中有机硒、蛋白硒、多糖硒和核酸硒的测定 编制说明.docVIP

《海产品中有机硒和无机硒的测定 氢化物发生原子荧光光谱法》 标准编制说明 标准编制的意义和任务来源 海产品中的硒以不同的化学形式存在，包括无机硒和有机硒，而有机硒包括蛋白硒、多 糖硒和核酸硒等。人体的硒主要通过饮食摄取，海产品中硒的含量较高，是人们获得硒的一 个重要饮食来源。DB6124.01-2010《富硒食品硒含量分类标准》[1]规定了富硒水产及制品中硒含量指标为0.02-1.00mg/kg。食品中硒的可利用价值由硒的化学形态决定，有机硒比无机硒具有较高的生物活性（比无机硒约高100倍）和较低的毒性，仅由总硒含量不足以了解其对人体健康的影响。硒作为构成海产品中多种蛋白质的必需成分，具有催化和结构功能。因此，进行海产品中硒的化学形态测定非常重要。但目前我国只有食品中总硒测定的国家标准（GB 5009.93-2010），未有海产品中有机硒和无机硒测定的相关国家标准或者行业标准。 顺序注射-氢化物发生-原子荧光光谱法（SI-HG-AFS）是近年来发展较快的检测新技术，与常规的断续流动-氢化物发生-原子荧光光谱法相比，具有灵敏度高、检出限低、稳定性好、节省试剂、液流无脉动、操作简便快速、准确、干扰小、仪器价格低、易于普及等优点，特别适合于易形成氢化物元素的测定，已成为世界公认有效的分析方法，在食品、医药、环保等多个领域得到了广泛的应用。 经国家认证认可监督管理委员会批准下达了《海产品中有机硒、蛋白硒、多糖硒、核酸硒的测定》的制标任务，由浙江局负责起草制订，计划编号为2012B147。 二．标准项目名称调整的情况说明 标准起草小组已完成该标准项目海产品中无机硒、有机硒、蛋白硒、多糖硒、核酸硒的提取分离和测定，并建立了海产品中无机硒含量的测定方法，有机硒含量可由总硒含量减去无机硒含量得到，但由于购买不到蛋白硒、多糖硒及核酸硒标准样品而无法进行海产品中蛋白硒、多糖硒、核酸硒的方法验证试验（蛋白硒、多糖硒及核酸硒标准样品生产企业倒闭，而联系多家其他公司都说没有蛋白硒、多糖硒及核酸硒标准样品）。为此标准起草小组申请调整标准项目名称为“海产品中有机硒和无机硒的测定 氢化物发生原子荧光光谱法”。认监委经征求食品专业委意见，考虑到实际困难，批复同意调整该标准项目名称为“海产品中有机硒和无机硒的测定 氢化物发生原子荧光光谱法”。 三． 标准编制的依据 本标准方法严格按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则 第一部分：标准的结构和编写》 [2]和GB/T20001.4-2001《标准编写规则 第四部分：化学分析方法》[3]的要求编写。在参考GB 5009.93-2010《食品安全国家标准 食品中硒的测定》[4]和有关文献[5]的基础上，通过大量基础性实验研究、实际样品检测和方法验证后制定本标准。 四． 标准方法概述 无机硒的测定：称取2.5 g试样(精确到0.001 g)置于25 mL具塞刻度试管中，加入 (1+1)盐酸并定容至25.00 mL，混匀后置于60℃恒温水浴中200 r/min振荡浸提18 h，取出冷却至室温，再经脱脂棉过滤。将滤液倒入分液漏斗中，加入5 mL环己烷萃取，收集水相于烧杯中。准确吸取4.00 mL水相于10 mL具塞刻度试管中，置于沸水浴中20 min，取出冷却至室温，分别加入 (100 g/L)铁氢化钾1.0 mL 、3滴正辛醇， 用水定容至10 mL，摇匀，用氢化物发生原子荧光光谱法检测，外标法定量。 有机硒由总硒减去无机硒得到。 方法研制中，充分考察了样品中无机硒提取条件的影响、HG-AFS测定条件的选择、 基体干扰、硼氢化钠浓度和酸度等因素的影响，针对实验样品选择合适的校准曲线范围，并进行精密度试验、加标回收试验和方法验证试验，各项结果表明，本标准方法的分析性能指标符合分析要求，完全满足海产品中有机硒和无机硒的测定要求。 五． 标准方法的可行性研究 5.1 无机硒提取的条件选择 5.1.1 无机硒提取剂的选择 试验参考DB 3301/T 117-2007[6]提取稻米样品中无机硒方法和GB/T 5009.11-2003[7]提取食品中无机砷方法，试验了不同提取剂对添加0.200mg/kg硒标准的海蟹(无机硒含量为0.188mg/kg)中无机硒提取的影响，结果见表1。由表1可知，采用盐酸作为提取剂回收率较高，且随着盐酸浓度的增加而提高，盐酸浓度达到(1+1)后趋于平稳。考虑到安全因素，故选择(1+1)盐酸作为海产品中无机硒提取剂。 表1 提取剂对无机硒提取的影响 n=3 提取剂 添加质量浓度/mg/kg 回收量/mg/kg 回收率/% RSD/%