肿瘤实验动物模型的制备.docVIP

上海交通大学医学院 教 案 课程名称：实验动物学 　　第 1，2 次课 2008 年 3 月 4 日 教师姓名 佟大年 职称 医师 教研室 外科 教学时数 2学时 授课题目 肿瘤实验动物模型的制备 教学对象 03级五年制 授课地点 第六人民医院动物实验室 教学方式 多媒体授课、实验课 本课的重点、难点： 重点： 1 肿瘤实验动物模型的分类及基本原理 2 常用肿瘤实验动物模型的制备 难点： 肿瘤实验动物模型的制备 本次课应用的教具： 动物和器械 SD大鼠 手术刀 一把 直手术剪 一把 眼科剪 一把 蚊式血管钳 直、弯各两把 手术镊 有齿、无齿各一把 缝针 小圆针、三角针各一枚 丝线 适量 小拉钩 一把 2. 教具：多媒体教学（幻灯片）以及部分动物实验模型实例图片 3. 教材参考书：秦环龙主编的《普通外科实验动物学》讲义教材 主要教学内容：（可另附页） 一、实验动物的肿瘤模型的分类： 自发性肿瘤模型 诱发性肿瘤模型 移植性肿瘤模型 人体肿瘤的异种移植性肿瘤模型 二、胃癌动物模型的制备 胃腺粘膜穿挂含甲基胆蒽(MC)线结。 含MC的线结是用普通细线，在一端打结后，将线结置于盛有MC的小玻璃试管内，再在酒精灯上微微加温．使MC液化渗入线结而成。 小鼠禁食几个小时后，在无菌手术下打开腹腔，将胃取出，在腺胃前壁作一长约2cm的切口，缝针自切口进入胃腔，然后从幽门小弯侧粘膜面经肌层和浆膜穿出，在浆膜表面打结固定，使合MC线结紧贴于粘膜，顺序分别将腺胃切口和腹壁缝合。到达预定观察期时，将动物处死，取内脏进行组织学检查。 三、人肝癌的原位移植 人癌标本的选择：所取标本均经术前、术中、术后诊断为典型的原发癌，并且患者术前未接受任何化疗、放疗及免疫治疗。 首代移植术：将患者手术新鲜标本保持无菌，离体后立即置入RPMI—1640培养液中，在无菌条件下将瘤组织修剪成1～2mm3大小瘤块，同时将备好的正常裸鼠全麻。方法是将硫苯妥钠用生理盐水稀释后，按30mg?kg－1体重(即0.3～0.4ml?只－1)行腹腔注射，取左侧卧位，常规消毒皮肤，在右肋缘下行长l cm斜切口，打开腹腔，暴露移植脏器腔，将准备好的人癌组织块植入，0/8吻合线缝合，棉签粘血、止血，确保无明显出血后用酒精棉球消毒，0/3丝线、眼科小角针或圆针全层连续缝合切口，然后擦净周围血迹并消毒后放回笼中。整理用物、房间用0.2％过氧乙酸消毒。 传代移植术：当原位移植瘤长至1～2cm3时(约移植后3～5周)，将其全麻。在无菌条件下取出肿瘤。移植方法与步骤同首代移植术。同时将每次传代的部分瘤组织作病理、电镜及其它生化指标测定。 本 次 课 小 结 要 点 1 了解肿瘤动物模型的基本原理及主要分类 2 对常用肿瘤动物模型的制备有初步了解 3 锻炼基本的外科操作技术 本 次 课 复 习 思 考 题 1 肿瘤动物模型的主要分类及各自的定义 2人肝癌的原位移植动物模型制备的基本步骤 下 次 课 预 习 要 点