绣线菊二萜生物碱生物合成研究及滑桃树种壳化学成分分析.pdfVIP

摘 要 本论文建立了绣线菊二萜生物碱的LC-ESI-MS 定性和定量检测方法。根据电喷雾二 级串联质谱的撞击能量差异可以区别绣线菊二萜生物碱 atisine 和 hetisine 的骨架。 在优化质谱条件下，通过分析9 个绣线菊二萜生物碱的质谱裂解途径，发现hetisine 型二萜生物碱的二级质谱裂解能比atisine 型二萜生物碱的二级质谱裂解能高，因此 可以根据电喷雾二级串联质谱的撞击能量差别，简便快速地鉴定粉花绣线菊不同变 种中二萜生物碱的结构类型；用Xtarre C18 柱分离绣线菊二萜生物碱，流动相为甲醇 －水[95 : 5 (水中含0.1％三乙胺)]，使用电喷雾离子阱质谱检测，建立了粉花绣 线菊中二萜生物碱的LC-ESI-MS 定量检测方法；在粉花绣线菊椭圆叶变种（Spiraea japonica var. ovalifolia ）无菌苗的悬浮培养系中，检测到了多个atisine 型二萜生物碱。 在200 mg/L 的剂量下，几丁质可以诱导无菌苗悬浮培养系中spiramine A/B 的产量 13 15 高达150 mg/L （是空白对照的8 倍）。饲喂双标记的丝氨酸 （2- C, N-serine ），通 过LC-ESI-MS 和多级质谱检测，在产物中发现含有同位素标记的绣线菊二萜生物碱 （21-13 15 13 15 13 15 C, N-spiramine A/B 和21- C, N-spiramine C/D ），21- C, N-spiramine A/B 的 含量约为spiramine A/B 的1/20，表明绣线菊二萜生物碱的氮源为丝氨酸，首次证明 atisine 型二萜生物碱的合成途径是从二萜到二萜生物碱（Fig. 1 ）。 + CHO OH OH OHC atisane type (-)-atisirene OR HOCH CH NH O O OH N O OR N O 2 2 2 serine ketalization O HO O spiramine A/B (C/D) spiraminol spiramine A/B (C/D) Fig. 1. The hypothetic pathway from atisane-type diterpene to diterpene alkaloids. 图1 “Atisane 型二萜是atisine 型二萜生物碱的前体”的假说。 从滑桃树（Trewia nudiflora）种壳的乙醇提取物中分离到11 个化合物，它们的结构 分别鉴定为：9’- 甲基-americanol A（1）、9’- 乙基-isoamericanol A（2 ）、9’- 乙基-americanol A （3 ）、9’-丁基-americanol A （4 ）、2,3-二氢-3,6,7-三羟基-1-苯丙吡喃-4-酮（5 ）、 americanin （6 ）、isoamericanin （7 ）、 α,2’,4,4’-tetrahy