微卫星锚定PCR研究日本血吸虫及其中宿主的遗传变异.pdfVIP

硕士学世诸戈 2.方法: 根据中国日本血吸虫病流行地区和实际工作情况，收集中国台湾、 云南洱源、四川天全、安徽贵池、湖南岳阳、江西新建以及湖北武汉、 湖北钟祥、湖北阳新、湖北松滋共7省10地日本血吸虫标本和中国台 湾、云南洱源、四川天全、安徽贵池、湖南岳阳、江西新建以及湖北 武汉、湖北钟祥、湖北阳新、湖北松滋、湖北沙市、湖北石首、湖北 荆门、湖北应城、湖北赤壁共7省15地湖北钉螺标本。采用SSR-PCR 技术，对上述日本血吸虫和湖北钉螺基因组DNA进行PCR扩增，并 分别以曼氏血吸虫和曼氏血吸虫中间宿主双脐螺为对照。根据 SSR-PCR扩增的结果，分别计算日本血吸虫及湖北钉螺不同地域品系 间的遗传距离，并用SAS软件进行聚类分析，了解日本血吸虫及湖北 钉螺不同地域品系间的遗传变异情况，以及初步探讨日本血吸虫与中 间宿主之间的相互进化关系。 3.结果: (1)日本血吸虫 ① 种间差异:日本血吸虫与曼氏血吸虫种间的SSR-PCR扩增图 谱差异明显，两者间的遗传距离为0.861士0.010(0.846-0.875)，在树 状图中，它们可分为两个不同的种群; ② 日本血吸虫中国大陆品系与中国台湾品系之间的差异:中国大 陆品系与中国台湾品系之间亦存在较大差异，两者间的遗传距离为 0.316士0.067(0.176-0.378)，在树状图中，它们可分为两个不同的类; ③ 日本血吸虫中国大陆品系山区型之间的差异:来自西南山区的 云南洱源、四川天全两个地域日本血吸虫间的差异较小，它们之间的 遗传距离为0.067，在树状图中可归为一类; ④ 日本血吸虫中国大陆品系湖区型之间的差异:来自湘、鄂、皖、 华功声洲搜吠李何房否学院 赣的湖区型日本血吸虫间也存在一定的差异，它们之间的遗传距离在 0.0630.176之间，在树状图中总体上可归为一大类; ⑤ 日本血吸虫中国大陆品系山区型与湖区型之间的差异:以云南 洱源、四川天全为代表的西南山区型日本血吸虫与湘、鄂、皖、赣为 代表的湖区型 日本血吸虫间存在一定的差异，其遗传距离在 0.067-0.250之间，在树状图中，它们可分为两个不同的类; ⑥ 湖北省境内不同地域日本血吸虫之间的差异:来自湖北省境内 4个地域的日本血吸虫，它们之间也不完全相同，其遗传距离在 0.063-0.111之间，在树状图中，它们与其它湖区型日本血吸虫间存在 交错而分别位于不同的类中。 (2)湖北钉螺 ① 种间差异:本研究中采用曼氏血吸虫中间宿主双脐螺作为对 照，它与湖北钉螺的SSR-PCR多态性图谱差异较明显，两者间的遗传 距离为0.893士0.080(0.875-0.910)，在树状图中，它们可分为两个不 同的种群; ② 中国大陆钉螺与台湾钉螺之间的差异:中国大陆钉螺与台湾钉 螺之间存在较大差异，两者之间的遗传距离为 0.351士0.048 (0.263-0.445)，在树状图中，它们可分为两个不同的类; ③ 中国大陆钉螺山区型之间的差异:来自西南山区的云南洱源、 四川天全两个地域钉螺间的差异较小，它们之间的遗传距离为0.043, 在树状图中可归为一类; ④ 中国大陆钉螺湖区型之间的差异:来自湘、鄂、皖、赣的湖区 型钉螺间也存在一定的差异，它们之间的遗传距离在0.000-0.217之间， 在树状图中总体上可归为一大类; ⑤ 中国大陆钉螺山区型与湖区型之间的差异:以云南洱源、四川 华功群友大学伺豁杏学院 硬士.4}必h}戈 天全为代表的西南山区型钉螺与湘、鄂、皖、赣为代表的湖区型钉螺 间存在一定的差异，其遗传距离在0.182-0.308之间，在树状图中，它 们可分为两个不同的类; ⑥ 湖北省境内不同地域钉螺之间的差异:来自湖北省境内9个地 域的钉螺，它们之间也不完全相同 (除有的基本相同外)，其遗传距离 在0.000--0.167之间，在树状图中，它们与其它湖区型钉螺间存在交错 而分另”位于不同的类中。乡 a 结论: 本研究首次采用SSR-PCR方法对日本血吸虫及其中间宿主湖北钉 螺同时进行研究，更好的阐明了日本血吸虫与中间宿主之间的相互进 化关系。在日