大鼠前体脂肪细胞的增殖与分化研究.pdfVIP

摘 要 本文应用细胞培养技术，以大鼠为试验动物，在有血清条件下研究了大鼠脂肪组 织前体脂肪细胞的增殖与分化。 了实验分别以无血清、1%,10%,200/6胎牛血清培养大鼠的前体脂肪细胞:20日 龄、40日龄、60日龄大鼠的前体脂肪细胞以10%胎牛血清培养;前体脂肪细胞分别 用M199,RPM11640,DMEMH:am-FI2(1:1)三种培养基培养。细胞计数法测得前 体脂肪细胞16小时培养后的贴附率。1%,10%,20%胎牛血清培养组前体脂肪细胞 的贴附率均高于无血清培养组的贴附率 (P0.01),10%,20%胎牛血清培养组前体脂 肪细胞的贴附率均高于1%胎牛血清培养组的贴附率 (P0.01)110%胎牛血清培养组 前体脂肪细胞的贴附率与20%胎牛血清培养组前体脂肪细胞的贴附率相比差异不显 著。结果显示胎牛血清对于大鼠前体脂肪细胞的贴附率有促进作用，随着胎牛血清浓 度增大，前体脂肪细胞的贴附率随之增高，但20%胎牛血清与 10%胎牛血清对前体 脂肪细胞贴附率的影响差异不显著;不同培养基培养，前体脂肪细胞的贴附率差异不 显著，证明这三种培养基对大鼠前体脂肪细胞的贴附率没有影响。20日龄、40日龄、 60日龄大鼠前体脂肪细胞各组之间的贴附率差异显著 ((P0.05)，说明大鼠日龄影响 其前体脂肪细胞的贴附率，日龄越小前体脂肪细胞的贴附率越高. 实验以1%,5%,10%胎牛血清培养前体脂肪细胞，测定前体脂肪细胞的增殖结 果。5%,10%胎牛血清组细胞数高于1%胎牛血清组细胞数 ((P0.01).10%胎牛血清 组细胞数高于5%胎牛血清组细胞数 ((P0.05)。实验证实胎牛血清对于前体脂肪细胞 的增殖有促进作用，并且在10%胎牛血清范围内，前体脂肪细胞的增殖能力随着胎牛 血清浓度的增加而增强;实验用细胞计数法测定了大鼠前体脂肪细胞的生长曲线，描 述了本实验条件下前体脂肪细胞的生长规律.前体脂肪细胞的增殖符合正常细胞的增 殖规律，即经历潜伏期、指数生长期并有进入平台期趋势。前体脂肪细胞在接种后 40小时内开始增殖，前体脂肪细胞的倍增时间为62.6小时，5天培养期前体脂肪细 胞增加了3倍州 在有血清培养条件下，实验比较了消化法与组织块法、原代培养与传代培养前体 、，‘申户- 一 ~~~ 一 一 - 脂肪细胞的形态变化，表明消化法研究前体脂肪细胞分化优于组织块法。原代培养的 前体脂肪细胞形态变化与传代培养的前体脂肪细胞形态变化相似，但原代培养的细胞 成分相对于传代培养较混杂奋传代的前体脂肪细胞贴附率明显高于原代前体脂肪细胞 贴附率。李}发现大鼠前体月旨肪细胞的形态变化不依赖于细胞密度实·验观察了原代 消化法前体脂肪细胞的形态变化规律，测定出其充脂细脸的铭找瀚抓7/e.( 关键词:前体脂肪细nklj脂肪细胞培养大鼠 ResearchontheProliferationandDifferentiationofRatPreadipocytes Postgraduate:DuanYanlong Tutor-ProfessorYangGongshe (CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine, NorthwestScienceandTechnologyUnivercityofAgricultureandForestry) Abstract TheInvitromodelsofadipocytedifferentiationwereusedtoinvestigatethe proliferationanddifferentionofprimarypreadipocytefromratadiposetissueinserum supplemented. PreadipocyteswereseededinplatingmediumcontainingFBS-rfee(fetalbovine serum),1%FBS,10%FBSand20%FBS.Preadipocyteswereseededindiferentmedia includingM199medium,RPMI1640medium andDMEMH:amF-12(l:l)medium. Preadipocy